HOTAIR-siRNA通过miR-21对肝癌侵袭、转移的影响

王永玲，高建芝，闫姝洁，王 琼，韦立新

HOTAIR-siRNA通过miR-21对肝癌侵袭、转移的影响

王永玲1，高建芝2,3，闫姝洁2，王 琼3，韦立新3

目的探讨长链非编码HOTAIR靶控miR-21对肝癌细胞侵袭的影响及相关机制。方法采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)技术检测30例肝癌组织中miR-21的表达，及其与临床病理特征的相关性；HOTAIR的siRNA转染人肝癌HepG2细胞，采用Transwell小室法检测HepG2细胞的侵袭活性；应用qRT-PCR法检测HepG2细胞中miR-21的表达；采用Western blot法检测MMP-2蛋白的表达，并分析其与miR-21的相关性。结果qRT-PCR检测发现miR-21在肝癌组织中的表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.05)；miR-21表达与肿瘤恶性程度、分化程度及侵袭转移均呈正相关；与患者AFP、肿瘤大小及肿瘤数目无关。沉默HOTAIR基因后，HepG2细胞侵袭能力下降，miR-21基因和MMP-2蛋白的表达均下调且两者呈正相关。结论miR-21在肝癌组织中呈高表达，并与肝癌恶性程度、肿瘤分化、门静脉癌栓及侵袭转移有关；HOTAIR可能通过靶控miR-21的表达抑制肝癌细胞的侵袭与转移。

肝肿瘤；长链非编码RNA；miR-21；侵袭和转移；MMP-2

原发性肝癌是病死率极高的恶性肿瘤之一，除早期手术切除外，采用放、化疗均不能取得较好疗效。目前，诸多学者从生物学角度寻找治疗肝癌的靶点。研究表明，HOX转录反义RNA(HOX transcript antisense RNA, HOTAIR)在结直肠癌、肝癌、乳腺癌等肿瘤组织中的表达水平与其转移、复发及预后呈正相关[1-4]。文献报道，lncRNA和miRNA之间的关系密切，miRNA可通过作用于lncRNA影响肿瘤的发生、发展；lncRNA也可作为miRNA的前体，加工成miRNA后发挥作用。其中短链非编码RNA-21(miR-21)位于17q23.2染色体FRA17B脆性区域，是具有自主转录功能的miRNA，在胃癌、卵巢癌、胰腺癌、肝癌等肿瘤中呈过表达，且与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移密切相关[5-8]。目前，关于miR-21对肝癌细胞侵袭、转移相关信号蛋白的调节作用及其机制是否与长链非编码HOTAIR的调控尚不清楚。本文应用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)技术检测miR-21在肝癌中的表达及与临床病理特征的关系，并将HepG2细胞的HOTAIR基因沉默，观察肝癌细胞生物学行为的变化、miR-21基因和MMP-2蛋白的表达及两者的相关性，探讨HOTAIR靶控miR-21的表达对肝癌细胞侵袭、转移相关信号蛋白的影响。……