基于“形态+分子”方法对疑似灵芝属样品的基原探究△

2017-09-21 08:04:12董晓曼王亚君查良平蒋超金艳赵玉洋袁媛
中国现代中药 2017年7期

董晓曼,王亚君,查良平,蒋超,金艳,赵玉洋,袁媛*

(1.安徽中医药大学 药学院,安徽 合肥 230012;2.道地药材国家重点实验室培育基地 中国中医科学院 中药资源中心,北京 100700;3.国家纳米科学中心,北京 100190)

·基础研究·

基于“形态+分子”方法对疑似灵芝属样品的基原探究△

董晓曼1,2,王亚君3,查良平1,蒋超2,金艳2,赵玉洋2,袁媛2*

(1.安徽中医药大学 药学院,安徽 合肥 230012;2.道地药材国家重点实验室培育基地 中国中医科学院 中药资源中心,北京 100700;3.国家纳米科学中心,北京 100190)

目的:为疑似“灵芝”属样品基原探究提供性状和分子鉴定证据。方法:在基于传统形态特征初步鉴定基础上,对疑似灵芝属两样品ZZ和SS的rDNA-ITS区序列进行PCR扩增,经克隆测序后,与GenBank数据库中序列进行BlastN比对,样品及最相似物种ITS序列对齐后使用MEGA 6.0软件构建系统发育树。结果:测序得到样品ZZ和SS的rDNA-ITS区序列分别为752、753个碱基,与已发表极硬红皮孔菌(Pyrrhodermaadamantinum) rDNA-ITS 区序列相似度达99.0%,并在系统发育树中与极硬红皮孔菌聚为一支,而与紫芝、树舌灵芝遗传距离较远。结合样品ZZ和SS的子实体形态和扫描电镜观察鉴定结果判断其为极硬红皮孔菌。结论:基于rDNA-ITS区序列分析和系统发育树构建药用真菌分子鉴定方法,为疑似样品基原鉴定提供理论依据和技术支持。

分子鉴定;极硬红皮孔菌;ITS序列

药用真菌含有多种有效成分,具有抗肿瘤[1]、免疫调节[2]、抗菌[3]、抗病毒[4]、解毒保肝[5]、抗氧化[6]等多种药理活性。在市场上药用真菌常存在“同名异物”或“以假乱真”现象,因此对其基原准确鉴定是保证中药临床用药安全的重要基础。……

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