YAP调控Wnt信号通路影响肝癌细胞凋亡的研究

崔 宏， 杨楠木， 贺 涛， 万百顺， 韩 风

河南省肿瘤医院 郑州大学附属肿瘤医院肝胆胰腺外科，河南 郑州 450052

论著·肝相关疾病

YAP调控Wnt信号通路影响肝癌细胞凋亡的研究

崔 宏， 杨楠木， 贺 涛， 万百顺， 韩 风

河南省肿瘤医院 郑州大学附属肿瘤医院肝胆胰腺外科，河南 郑州 450052

目的探讨Yes相关蛋白(Yes associated protein, YAP)对肝癌细胞凋亡的影响。方法Western blotting方法检测人肝癌细胞HuH-7、HepG2、SNU-449和人正常肝细胞7702中YAP的表达水平。在肝癌细胞中转染YAP小干扰RNA1(YAP siRNA1组)和YAP小干扰RNA2(YAP siRNA2组)，同时转染对照siRNA(siRNA-NC组)，未转染组只加入转染试剂，培养48 h后，Western blotting检测细胞中YAP水平，筛选出干扰效率较高的YAP siRNA2继续研究。MTT检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，激光扫描共聚焦显微镜法检测活性氧(ROS)水平，Western blotting检测细胞中β-连环蛋白(β-catenin)、Wnt信号通路下游靶基因(C-myc)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)蛋白水平。结果人肝癌细胞HuH-7、HepG2、SNU-449中YAP表达水平均高于人正常肝细胞7702，且在HepG2细胞中YAP的表达水平最高。YAP siRNA1、YAP siRNA2能够成功干扰肝癌细胞中YAP的表达水平，且YAP siRNA2的干扰效率最高。YAP siRNA2组细胞存活率和细胞中β-catenin、C-myc水平均低于未转染组，凋亡率和细胞中Cleaved Caspase-3、ROS水平均高于未转染组(P<0.01)。结论干扰YAP表达后能够促进肝癌细胞凋亡，抑制肝癌细胞增殖，Wnt信号通路是其可能的作用机制之一。

肝癌；凋亡；增殖；Yes相关蛋白

肝细胞癌又称为肝癌,是目前世界范围内的第5大恶性肿瘤[1]。肝癌在中国的死亡率在全部恶性肿瘤中位居第2位[2]。肝癌的发生与癌基因有关，这些癌基因能够促进肝癌细胞的增殖，抑制肝癌细胞的凋亡导致肝癌细胞中癌症发生有关的信号通路异常激活引起肝癌的恶化[3-4]。Yes相关蛋白(Yes associated protein, YAP)是一种癌基因，在宫颈癌、肝癌、肾癌等多种癌症的形成过程中发挥促进作用[5-7]。……