脂多糖诱导SPLUNC1基因的表达

肖丁良 钟礼立 高喜容

论 著

脂多糖诱导SPLUNC1基因的表达

肖丁良 钟礼立 高喜容

目的了解脂多糖（LPS）对人支气管上皮细胞（HBECs）增殖的影响，通过观察不同浓度脂多糖（LPS）不同时间诱导HBECs的短上腭、肺及鼻咽上皮克隆1（SPLUNC1）基因表达情况，探讨SPLUNC1在呼吸道感染中的作用。方法采用0.01、0.1、1.0、10 mg/L LPS诱导HBECs，通过噻唑蓝（MMT）法检测LPS对HBECs增殖的影响，诱导HBECs 2、4、8、16、24 h后通过实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测SPLUNC1基因表达情况，结果以SPLUNC1/GAPDH基因拷贝数比值表示。结果0.01、0.1、1.0、10 mg/L的LPS均可抑制HBECs的生长〔吸光度（A值）：0.48±0.03、0.37±0.01、0.30±0.03、0.27±0.02，相对生长指数：94.12%、72.55%、58.82%、52.94%〕，并能诱导SPLUNC1基因表达上调；在同一浓度组，LPS刺激细胞2 h后SPLUNC1基因表达开始上调，随着时间延长逐渐升高，呈时间依赖性〔0.01 mg/L组2、4、8、16、24 h分别为0.19±0.03、0.24±0.04、0.26±0.03、0.44±0.05、0.51±0.07；0.1 mg/L组分别为0.43±0.02、0.52±0.05、0.60±0.06、0.63±0.08、0.68±0.05；1.0 mg/L组分别为0.44±0.02、0.48±0.02、0.50±0.03、0.58±0.05、0.70±0.06；10 mg/L组分别为0.34±0.03、0.38±0.04、0.68±0.05、0.96±0.08、0.98±0.07〕，不同时间点组间比较差异有统计学意义（均P＜0.01）。结论LPS可抑制HBECs的生长，能诱导HBEC细胞SPLUNC1基因表达上调，并在一定浓度范围内表达呈时间依赖性，推测SPLUNC1可能参与细菌感染最初的防御。

脂多糖； 人支气管上皮细胞； 短上腭、肺及鼻咽上皮克隆1

革兰阴性（G-）菌是儿童呼吸道感染常见病原菌［1］；也是医院感染主要病原菌［2］。G-菌对抗菌药物耐药性逐年增加，除合理选择抗菌药物降低耐药性外，还应研发新型抗菌药物、寻找其他抗菌物质。

黏膜分泌蛋白人上腭、肺及鼻咽上皮癌相关蛋白（PLUNC）家族是呼吸道的先天免疫防御物质，在保护呼吸道正常的生理功能中起重要作用，而短上腭、肺及鼻咽上皮克隆1（SPLUNC1）是其家族中高表达于呼吸道并参与先天免疫应答的蛋白分子。目前对SPLUNC1作用机制和功能的研究还没有一致的定论，但大多认为它参与了呼吸道抵御病原菌的先天免疫应答，且很有可能拥有抑菌、杀菌的作用，可能成为将来抗菌药物耐药压力下的另一种抗菌物质选择方案。……