赵成军+马雄辉+李建平
摘要采用抗原决定基法制备了胰岛素电化学分子印迹传感器。以胰岛素C端多肽作为模板分子,定向自组装在Au电极上,以邻苯二胺为功能单体,电化学聚合制备分子印迹聚合膜。以NaOH为洗脱液,洗脱模板分子,形成的与胰岛素C端多肽三维结构相匹配的分子印迹孔穴能特异性识别胰岛素。重吸附胰岛素分子后,以K3[Fe(CN)6]/K4[Fe(CN)6]为探针,通过测量探针在电极表面产生的电流大小实现胰岛素的间接测定。在1.0 × 10
Symbolm@@ 14~5.0 × 10
Symbolm@@ 13 mol/L浓度范围内,传感器的电流响应值与胰岛素浓度呈良好的线性关系,检出限为7.24 × 10
Symbolm@@ 15 mol/L(3σ)。此传感器具有较好的选择性和稳定性,并成功用于血清样品中胰岛素的测定。
关键词胰岛素; 分子印迹; 电化学传感器; 抗原决定基法
1引 言
胰岛素是一种对体内碳水化合物和脂肪代谢调节至关重要的激素[1],对促进人体合成糖原、脂肪和蛋白质,以及人体细胞的生长发育和人体健康具有重要的意义。目前, 检测胰岛素的方法主要有酶联免疫分析法[2]、发光免疫分析法[3]、放射免疫分析法[4]和高效液相色谱法[5,6]等。这些方法存在易受干扰、测试条件苛刻、仪器昂贵等缺点。因此,建立特异性识别胰岛素的简便、快速的分析方法具有重要意义。
分子印迹传感器因其具有良好的特异性识别能力和操作简单等优点而迅速发展[7],并在蛋白质等大分子检测领域中得到广泛的运用[8~10]。Prasad等[11]以胰岛素为模板分子,以磷脂酰胆碱脂作为功能单体通过自由基聚合在多壁碳纳米管表面制备分子印迹聚合物(MIP)修饰电极,利用胰岛素含有的酪氨酸残基在0.8V产生不可逆氧化峰对胰岛素进行测定。……