肿瘤坏死因子α对大鼠骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

2017-10-24 00:34:04杜春彦张欢杨静王晓晨冯泽国郭全义
生物技术通讯 2017年5期
关键词:环境

杜春彦,张欢,杨静,王晓晨,冯泽国,郭全义

1.清华大学附属北京清华长庚医院 麻醉科,北京 102218;2.解放军总医院 麻醉手术中心,北京 100853;3.骨科再生医学北京市重点实验室,全军骨科战创伤重点实验室,北京 100853

肿瘤坏死因子α对大鼠骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

杜春彦1,张欢1,杨静2,王晓晨2,冯泽国2,郭全义3

1.清华大学附属北京清华长庚医院 麻醉科,北京 102218;2.解放军总医院 麻醉手术中心,北京 100853;3.骨科再生医学北京市重点实验室,全军骨科战创伤重点实验室,北京 100853

目的:探讨不同浓度肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物学特性的影响。方法:采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMSCs,倒置显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测BMSCs表面标记物;分别以10、100、1000 ng/mL的TNF-α完全培养液预处理P3代BMSCs,并设置仅含培养基的空白对照组,24 h后采用ELISA试剂盒检测细胞培养上清液中IL-6、IL-10的表达水平;胰酶消化细胞,用PrestoBlue法检测10、100、1000 ng/mL TNF-α完全培养液预处理BMSCs后细胞增殖活性。结果:ELISA检测结果显示,与对照组相比,各浓度TNF-α干预组IL-6、IL-10均有不同程度升高,差异有统计学意义(P<0.05),且1000 ng/mL TNF-α干预组IL-10表达水平最高,其浓度为170.2±11.9 pg/mL,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);100 ng/mL TNF-α干预组IL-6表达水平最高,其浓度为144.0±18.6 pg/mL,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。PrestoBlue检测结果显示,与对照组相比,10、100、1000 ng/mL TNF-α干预组荧光值均增高,差异有统计学意义(P<0.05),但组间荧光值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:10~1000 ng/mL TNF-α可促进BMSCs的增殖,且随着TNF-α浓度的升高,BMSCs分泌促炎因子IL-6的能力降低,分泌抑炎因子IL-10的能力升高。

骨髓间充质干细胞;……

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