健脾补土组方对体外神经元低氧/复氧后PI3K、Akt、Caspase-3表达的影响

陈昱文 ，李 花 ，3*，刘旺华 ，3，周小青 ，3，郑彩杏 ，金 梦 ，范元硕 ，李诚均 ，颜艳艳

（1.湖南中医药大学中医诊断研究所，湖南 长沙 410208；2.湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室，湖南 长沙 410007；3.湖南中医药大学数字中医药协同创新中心，湖南 长沙 410208）

健脾补土组方对体外神经元低氧/复氧后PI3K、Akt、Caspase-3表达的影响

陈昱文1，2，李 花1，2，3*，刘旺华1，2，3，周小青1，2，3，郑彩杏1，2，金 梦1，2，范元硕1，2，李诚均1，2，颜艳艳1，2

（1.湖南中医药大学中医诊断研究所，湖南 长沙 410208；2.湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室，湖南 长沙 410007；3.湖南中医药大学数字中医药协同创新中心，湖南 长沙 410208）

目的观察健脾补土组方对新生SD鼠神经元体外培养低氧/复氧后的凋亡情况以及PI3K、Akt、Caspase-3表达的影响，探讨其减少神经元凋亡的作用机制。方法原代分离培养新生SD鼠神经元，随机分为正常血清对照组、低氧模型组、神经生长因子组、健脾补土组。将标本低氧诱导24h，再复氧培养4h进行造模。用流式细胞术检测神经元凋亡情况，RT-qPCR法检测 PI3K、Akt、caspase-3mRNA的表达，免疫细胞化学法和Western blot法检测PI3K、Akt、caspase-3蛋白的表达。结果与正常对照组相比，低氧模型组神经元凋亡率显著增加，PI3K、Akt mRNA与蛋白表达显著减少，Caspase-3mRNA与蛋白表达显著增加；与低氧模型组比较，神经生长因子组、健脾补土组神经元凋亡率均显著减少，PI3K、Akt mRNA及蛋白表达显著增强，Caspase-3mRNA及蛋白表达显著较少（P＜0.01）；与神经生长因子组比较，健脾补土组神经元凋亡率显著减少，PI3K、Akt mRNA及蛋白表达显著增加，Caspase-3mRNA及蛋白表达显著降低。结论健脾补土组方能减少脑缺血后神经元的凋亡，其作用机制可能与其通过上调PI3K和Akt的表达水平，最终抑制在细胞凋亡中起关键作用的因子Caspase-3的表达有关。……