腹泻病人沙门菌的血清分布类型和耐药性状况解析

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腹泻病人沙门菌的血清分布类型和耐药性状况解析

陈琴,张瑞中,郭少燕

[目的]解析深圳市腹泻病人沙门菌的血清分布类型和耐药性状况，为临床诊疗提供依据。[方法]选取本院2013年—2015年323例腹泻病人作为研究对象，采用抗药性试纸测定沙门菌对抗菌药物的敏感程度。[结果]298株鉴定为血清型，25株不能确定类型，在298株血清型菌株中划分出60种血清类型，共发现23种沙门菌，主要为肠炎沙门菌占42.3%，猪霍乱沙门菌占28.9%，鼠伤寒沙门菌占8.7%，罗生沙门菌占7.0%，斯坦利沙门菌占3.4%。沙门菌药物敏感性实验结果表明：菌株对头孢噻肟敏感程度最大，达到92.6%，其次为头孢曲松(90.6%)、头孢拉定(88.9%)、头孢哌酮(86.2%)，沙门菌对亚胺培南和氨苄西林的敏感程度较低。[结论]深圳市腹泻案例主要由肠炎沙门菌和猪霍乱沙门菌构成。高气温季节的感染率高于低气温季节，临床应依照药物敏感结果选用抗菌药物，应首选头孢噻肟。

深圳；腹泻；沙门菌；血清型；抗药性

沙门菌能够引发人类产生腹泻以及食物中毒状况，全世界每年有1 800万例沙门菌急性感染病人，其中致死病人达到68万例，世界卫生组织已经把该病罗列为存在重要影响的食物性传播疾病。多年以来，沙门菌在深圳市基于食物中毒产生的病原菌中通常位居前列。此外，基于抗生素的不科学选取并且广泛采用耐药病株使得沙门菌发生多层级的耐药状况。自从1990年起，具备ACSSuT耐药状况的DT104模式属伤寒沙门菌在欧美等国家迅速传播，因而关于沙门菌检测和抗药性的研究非常重要。本研究针对2013年—2015年发生在深圳市龙华新区人民医院的腹泻病人进行沙门菌血清解析以及抗药性分析，以了解本区域沙门菌分布以及耐药情况，为临床科学选取抗生素提供理论依据。

1 选材和方法

1.1 选材

1.1.1 菌体来源 从深圳市龙华区人民医院2013年—2015年获得临床腹泻疑似沙门菌感染病人323例，男163例，女160例；门诊198例，临床125例；年龄18 d至6岁。

1.1.2 实验材料和质量控制 亚硒酸胱氨酸增菌溶液[1]、沙门菌显色培养基、革兰阴性菌鉴别卡、12种抗药性试纸以及水解酪蛋白琼脂、沙门菌诊疗血清、Vitek 3 compack[2]、药品敏感性试纸。质量控制菌株选取抗生素敏感实验控制菌株ATCC25863和ATCC37969。

1.2 方法

1.2.1 菌株的鉴别和分类 依照国家指标GB 352 4889.4-2012进行关于疑似沙门菌的菌株测定，选取智能化生化方式对沙门菌诊断血清进行鉴定。

1.2.2 抗生素药品的敏感性测定 选取琼脂延展方法，根据美联邦指定的临床实验室规则委员会制定的准则对抑菌群进行判别。采用12种药物敏感试纸，包含氨苄西林10 μg、头孢拉啶30 μg、头孢吡肟30 μg、头孢噻肟30 μg、环丙沙星5 μg、氯霉素30 μg、链霉素10 μg、磺胺复合物300 μg、四环素30 μg、萘啶酸30 μg、庆大霉素30 μg、甲氧苄啶5 μg。

1.3 统计学方法 选取SPSS 15.0统计软件[3]进行数据统计分析，构成比比较采用χ2检验，以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 323株沙门菌血清分型结果

2.1.1 沙门菌病人年龄分布 共采集323株疑似沙门菌菌株，通过检验能够认定298株为血清型，其余25株不能确定类型，298株划分为60种血清类型，年龄主要在4岁以下，占98%，6岁以上人群患沙门菌感染腹泻[4]的概率较小。见图1。

图1 2013年—2015年患沙门菌腹泻病人年龄分布

2.1.2 沙门菌病人发病时间分布 从时间分布来看，沙门菌病人发病时间大多分布在6月～10月，占65%，2015年沙门菌腹泻病人发病时间见图2。

图2 2015年沙门菌腹泻病人发病时间分布

2.1.3 沙门菌类型分布 本研究检测出的沙门菌类型有23种，其中分离数目在5株之上的血清类型有6种[5]，排在前5位有肠炎沙门菌(42.3%)、猪霍乱沙门菌(28.9%)、鼠伤寒沙门菌(8.7%)、罗生沙门菌(7.2%)和斯坦利沙门菌(3.4%)。298株沙门菌类型分布见表1。

表1 298株沙门菌群别及血清型分布情况

2.2 沙门菌药物敏感性和抗药性 沙门菌的抗药性实验结果表明：菌株对头孢噻肟敏感度最大，达到92.6%，其次为头孢曲松，敏感度为90.6%，对头孢拉定的敏感度为88.9%，对头孢哌酮的敏感程度为86.2%，沙门菌对亚胺培南和氨苄西林的敏感度较低[6]。沙门菌对氨曲南、氯霉素、头孢曲松、头孢噻肟以及氨苄西林的抗药程度[7]均超过16%，氨苄西林、头孢噻肟、头孢曲松以及头孢拉定的中介比例较低，亚胺培南、头孢哌酮和氨曲南的中介比例较高。见表2。

表2 沙门菌药物敏感性和抗药性情况(n=298) 株(%)

2.3 沙门菌对药物的抗药性 10种抗菌药物包括氨苄西林、亚胺培南、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢拉定、头孢曲松、氨曲南、氯霉素、克拉维酸和链霉素。本研究选用8种245株沙门菌完成抗药性实验，在298株沙门菌中抗药性达到3种之上的沙门菌菌株为205株，占68.8%，各类血清模式沙门菌的多层级抗药性能存在差异，其中鼠伤寒类型的沙门菌多重耐药特性[8]层级以8抗药性的菌株数目为主，肠炎类沙门菌则以4抗药性为主，乙型副伤寒类沙门菌则以6抗药性为主，而彻斯特沙门菌的多层级抗药效能较轻。在抗药性谱模式上产生ACSSuT和抗药谱[9]，该抗药谱包含氨苄西林、亚胺培南、头孢哌酮、氨曲南和氯霉素等5类以及更多种类的抗药性药物的菌株达到143株。其中肠炎沙门菌抗药程度较高，达45.2%。245株沙门菌对10种药物均具有抗药性，主要包含肠炎12株、猪霍乱10株、鼠伤寒1株。血清类型沙门菌多层级抗药率见表3。

表3 血清类型沙门菌多层级抗药率 %

3 讨论

3.1 2013年—2015年腹泻类沙门菌血清型分布 本研究结果发现，深圳市腹泻案例主要由肠炎沙门菌和猪霍乱沙门菌构成，该现象和相邻的江苏省状况类似，但和国内的其他区域存在一定差别，东南沿海区域主要以鼠伤寒沙门菌为主。

3.2 腹泻沙门菌发生的季节和年龄特点 从图中可看出：腹泻病人发病时间多在6月～10月，占发病总数的65%，提示温度为腹泻类沙门菌增殖的一个主要因素。研究结果表明：1月沙门菌感染病例较少，占2.3%，2月～4月沙门菌感染病例逐步增多，但该时段的发病率总体较低，占22.3%，5月～6月呈现沙门菌感染发病的小高峰，占13.0%，7月～9月沙门菌感染病例达到高峰，占42.0%。9月～10月沙门菌感染病例逐步下降，11月～12月沙门菌感染病例数较少。4岁以下的幼儿占98%，超过6岁的人群患沙门菌感染腹泻的概率较小。

3.3 儿童腹泻沙门菌抗感染治疗分析 美联邦抗生素抗药性监测发现，23.7%的非伤寒类型的沙门菌最少包含1类及其以上的抗生素，其中最为多见的为多重抗药谱，ACSSuT+抗药谱[10]。本研究发现：298株沙门菌对3类以上的抗菌药物的耐药性高达205株，抗药性达到68.8%，说明该区域的沙门菌菌株包含多层级的抗药状况。鼠伤寒沙门菌为耐药层级最为重要的血清类型，并且在抗药性谱模式上，产生ACSSuT和抗药谱，本研究结果和山东省的研究结果类似[11]。本研究中沙门菌对于头孢类抗生素敏感度在86%以上，因而头孢类抗菌药依旧是临床治疗沙门菌感染的首选药物，但长时间采用3代或者4代的头孢菌素易获得超广谱β-内酰胺酶菌株，因而在医学实验中，若要完全治愈沙门菌感染应当联合用药。

3.4 深圳市腹泻病人沙门菌实验启示 在现有的农牧业以及养殖业的发展中主要选取抗生素作为养殖材料并且混合添加剂等物质防范家禽传染病，长时间选用抗生素的结果使得菌类获得耐药特性，尤其是多层级耐药特性，而该类耐药菌类依照各类方式反馈到人类身上。美国食品检测机构2012年相关研究数据显示：在养殖业中选取的抗生素大约3 000万磅，而该年实现人类病症医疗选取的抗生素大约为800万磅。此外，科研者针对美国市面上售卖的生肉实现抗药菌株的检验，结果显示80.5%的火鸡肉、68.5%的猪肉以及56.2%的牛肉有耐药菌类，并且具有抗药性质的沙门菌检出率较高，72%的火鸡肉类被检测得到包含最少两种抗生素的抗药性沙门菌。当前，食品中对沙门菌的抗药性程度较高，因而对现实医疗实践具有较高的价值。

[1] 景钦隆，毛新武，何洁仪，等.2006—2008年广州市食源性疾病暴发监测分析[J].中国食品卫生杂志，2010，22(2)：160-164．

[2] 程春荣，沈艳丽，董柯，等．郑州市2006—2011年腹泻病人中沙门菌血清型和耐药谱分析[J].中国人兽共患病学报，2012，28(10)：1017-1019．

[3] 罗湘蓉，唐祥蜀，陆春凤．沙门菌感染血清型及药物敏感性分析[J].检验医学与临床，2012，6(24)：2106-2107．

[4] 黄冰，周勇，龙佳丽，等.2013年广州市腹泻病人沙门菌血清分型及耐药性分析[J].热带医学杂志，2015，1(7)：975-977.

[5] 周勇，张欣强，侯水平，等．广州市76株沙门菌的血清型分布及耐药性分析[J]．现代预防医学，2014，41(2)：349-352．

[6] 侯水平，伍业建，周勇，等．广州市2012年腹泻病人沙门菌血清学、耐药及PFGE分型分析[J].现代预防医学，2014，41(5)：2689-2692；2696．

[7] Ke B，Sun J，He D，etal． Serovar distribution，antimicrobial resistance profiles，and PFGE typing of Salmonella enterica strains isolated from 2007—2012 in Guangdong，China[J]．BMC Infect Dis，2014，14：338．

[8] 梁兆铭，柯碧霞，邓小玲，等．2010—2011年广东地区人源主要血清型沙门菌喹诺酮耐药特征分析[J]．华南预防医学，2013，39(6)：27-32．

[9] Franklin R,Jean B,Jeff,etal.Clinical and laboratory standards institute，performance standards for antimicrobial susceptibility testing：twenty-first informational supplement M100-S24[J]．CLSI Wayne，PA：USA，2012,33(1):107-115．

[10] Paraskevis D，Kostaki E，Magiorkinis G，etal.Prevalence of drug resistance among HIV-1 treatment-naive patients in Greece during 2003—2015:transmitted drug resistance is due to onward transmissions[J].Infection Genetics and Evolution,2017,54:183-191.

[11] 师伟,夏琳林,刘晓霞,等.临床分离非伤寒沙门菌耐药性及对头孢曲松耐药机制[J].中国感染控制杂志，2016，15(4)：217-221.

AnalysisofserumdistributionanddrugresistanceofSalmonellaindiarrheapatients

ChenQin，ZhangRuizhong，GuoShaoyan

(People’s Hospital of New District Longhua District Shenzhen,Guangdong 518109 China)

R473.57

A

10.3969/j.issn.1009-6493.2017.32.040

1009-6493(2017)32-4170-03

陈琴，护师，本科，单位：518109，深圳市龙华新区人民医院；张瑞中、郭少燕单位：518109，深圳市龙华新区人民医院。

信息陈琴,张瑞中,郭少燕.腹泻病人沙门菌的血清分布类型和耐药性状况解析[J].护理研究，2017，31(32)：4170-4172.

2016-08-31；

2017-10-16)

(本文编辑 范秋霞)