2014-2016年粤北地区规模化猪场伪狂犬病血清学调查与分析

南文金，黄健强，吴静波，胡鸿惠，彭国良

（韶关学院动物疫病实验室，广东韶关512005）

2014-2016年粤北地区规模化猪场伪狂犬病血清学调查与分析

南文金，黄健强，吴静波，胡鸿惠，彭国良

（韶关学院动物疫病实验室，广东韶关512005）

为了解粤北地区猪伪狂犬病（Pseudorabies,PR）毒野毒感染及疫苗免疫情况，用ELISA方法对2014-2016年粤北地区25个规模猪场送检的3 895份（49批次）血清进行了伪狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）gE抗体和gB抗体检测.检测结果显示，粤北地区2014-2016年猪场PR野毒阳性率分别为78.57%、77.78%和64.71%，样品阳性率分别为7.02%、9.72%和10.44%.2014-2016年公猪、经产母猪、后备母猪、保育猪和生长育肥猪gE抗体总阳性率分别为11.72%、10.3%、9.49%、4.89%和14.61%，不同猪群间PR野毒感染率差异显著.2014-2016年不同猪群PRV gB抗体调查结果显示，公猪、经产母猪、后备母猪、保育猪和生长育肥猪总阳性率分别为96.55%、98.97%、92.4%、65.23%和35.79%.结果表明，粤北地区规模猪场PR野毒感染普遍存在，整体阳性率相对不高；种猪群PR疫苗免疫抗体水平较高，但保育猪群和生长育肥猪群疫苗抗体水平较低，成为野毒感染高风险群体.

猪；伪狂犬病毒；gE抗体；gB抗体；调查分析

伪狂犬病（Pseudorabies,PR）是由伪狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的多种家畜和野生动物发病的一种传染病［1］.在畜牧业生产中，PRV对养猪业的危害最为严重，临床上可引起母猪繁殖障碍，仔猪神经症状、腹泻和中大猪呼吸道疫病.猪场一旦爆发该病，往往造成较大经济损失.在养猪生产中，该病可以通过免疫猪伪狂犬疫苗进行预防，特别是PRV基因工程疫苗的广泛应用，不但有效控制了该病在我国的流行，一些猪场还成功净化了该病.但近几年来，PR在我国部分地区猪场爆发并广泛流行，部分PRV野毒阴性猪场迅速转阳，成为近年对我国养猪业影响较大的疫病之一［2-3］.

免疫PRV基因工程疫苗的猪群，可以通过检测血清中gE抗体来评估野毒感染情况，通过检测血清中gB抗体对疫苗免疫效果进行评估，为猪场开展PRV净化及防控提供科学依据.为了解粤北地区近三年来猪PR流行动态和免疫情况，对2014-2106年粤北地区部分规模猪场送检的血清样品进行了PRV gE抗体和gB抗体检测，并对检测数据进行了统计分析.

1 材料和方法

1.1 样品信息

201 4-2016年粤北地区25个规模化猪场49批次送检的3 895份血液样品，实验室常规方法分离血清，4℃冷藏保存待检.所检猪场均已免疫接种猪伪狂犬病毒基因工程疫苗.

1.2 检测方法

猪伪狂犬病毒gB抗体检测试剂盒和gE抗体检测试剂盒均使用美国IDEXX公司生产的ELISA检测试剂盒，严格按试剂盒使用说明书进行操作.

1.3 结果判定

根据S/N值来判定抗体阴阳性，当S/N≤0.6，样品判定为gE(gB)抗体阳性；当0.6＜S/N≤0.7，样品判定为gE(gB)抗体阴性，判为可疑；当S/N＞0.7，样品判定为gE(gB)抗体阴性.

1.4 数据统计

分年度统计检测猪场gE抗体阳性率、样品gE抗体阳性率、不同猪群gE抗体阳性率和gB抗体阳性率.

2 结果

2.1 猪场伪狂犬野毒感染情况调查结果

201 4-2016年粤北地区规模化猪场PR野毒感染情况调查结果见表1.结果显示，猪场PR野毒阳性率分别为78.57%、77.78%和64.71%.样品阳性率分别7.02% 、9.72%和10.44%.结果表明，近三年来粤北地区规模化猪场野毒感染情况普遍存在，猪场阳性率呈逐年下降趋势，但样品阳性率呈逐年上升趋势.

2.2 不同猪群伪狂犬野毒感染情况调查结果

201 4-2016年对不同阶段猪群PR野毒感染情况统计见表2.结果显示，不同年份不同阶段猪群PR野毒阳性率不同，三年间公猪、母猪和后备猪群样品总阳性率差异不大，分别为11.72%、10.3%和9.49%，保育猪群PR野毒阳性率最低为4.89%，生长育肥猪群PR野毒阳性率最高，为14.61%.从分年统计结果来看，公猪群2016年PR野毒阳性率最高，达到18.18%，母猪群2015年阳性率最高，达到14.98%，后备猪群2016年阳性率最高，达到12.98%，保育猪群2016年阳性率最高，达到7.57%，生长育肥猪群阳性率呈逐下降趋势，从2014年阳性率12.91%下降到2016年的9.27%.

表1 伪狂犬野毒感染情况调查结果

表2 不同猪群伪狂犬野毒感染情况调查结果

2.3 猪伪狂犬疫苗抗体阳性率调查结果

201 4-2016年粤北地区规模猪场不同阶段猪群猪伪狂犬病毒gB抗体调查结果见表3.结果显示，公猪和母猪gB抗体阳性率较高，平均阳性率分别为96.55%和98.97%.2014-2016年后备母猪gB抗体阳性差别较大，分别为81.55%、93.29%和92.22%.保育猪和生长育肥猪gB抗体阳性率较低，其中生长育肥猪阳性率最低，在35%～40.24%.

3 讨论

gE基因是PRV一个主要毒力基因，当前养猪业广泛使用的PRV基因工程疫苗都缺失了gE基因，免疫gE基因缺失的PRV基因工程疫苗后不会产生针对gE蛋白的抗体，而感染PRV野毒株的猪会产生gE抗体，因此，免疫过PRV基因缺失疫苗的猪群，可以通过检测gE抗体对猪群感染猪PRV野毒情况做评估［4］。

表3 不同猪群伪狂犬疫苗抗体水平调查结果

表1结果表明，2014-2016年粤北地区规模化猪场猪PRV野毒阳性率都在70%以上，三年来猪场阳性率差别不大，但样品阳性率却呈现逐年上升趋势，三年间检测的样品gE抗体阳性率分别为7.02%、9.72%和10.44%.

表2对不同阶段猪群PRV野毒感染情况统计表明，不同猪群间gE抗体阳性率差异显著.2014-2015年PRV野毒感染率最高的猪群为生长育肥猪，gE阳性率为分别为23.91%和14.15%，但生长育肥猪gE抗体阳性率三年间呈现逐年降低趋势，至2016年下降到9.27%.公猪、母猪和后备猪gE阳性率各年间差异较大.保育猪阳性率最低，2014-2016年阳性率分别为3.81%、3.67%和7.57%.2016年公猪和后备猪PRV野毒感染率明显高于2014年和2015年，这是由于2016年在检测的一个猪场引进公猪和后备母猪时没有进行引种前检测，引进了部分PRV gE抗体阳性种猪导致该年公猪和后备母猪PRV野毒感染率升高.粤北地区规模化猪场 2014-2016 年猪场阳性率高于湖南［5］、福建［6］、广西［7］、安徽［8］等地区，但样品阳性率则比大多数地区报道的阳性率要低，这表明PRV野毒在粤北地区规模化猪场普遍存在，但猪群感染程度相对较低，这一调查结果和李段等对广东省猪伪狂犬病流行病学调查结果相一致［9］.

gB蛋白是PRV重要糖蛋白，gB蛋白能诱导机体产生中和抗体，因此，通过检测PRV gB抗体可以对PRV疫苗免疫效果进行评估.表3对2014-2016年粤北地区规模化猪场PRV gB抗体检测结果显示，公猪和母猪gB抗体总阳性率都在90%以上，最低的2014年公猪阳性率为94.28%，疫苗免疫效果较好；后备猪群疫苗免疫效果各年差异较大，保育猪和育肥猪疫苗抗体合格率较低，特别是生长育肥猪，2014-2016年gB抗体阳性率虽然逐年上升，但最高的2016年也仅为44.96%.对比生长育肥猪gE抗体和gB抗体阳性率变化趋势可以发现，在gB抗体合格率逐年升高的同时，粤北地区规模化猪场育肥猪群中gE抗体阳性率呈逐年下降.这一结果也充分说明近几年导致伪狂犬病爆发和流行的一个重要原因就是忽视了中大猪的疫苗免疫.长期以来，由于伪狂犬疫苗良好的免疫效果使得猪伪狂犬病在规模化猪场很少发生，因此，许多猪场仅对种猪群进行免疫，对商品猪群不进行疫苗免疫或仅采用的是1日龄滴鼻免疫，随着母源抗体下降，保育后期PRV抗体合格率开始迅速下降，造成中大猪疫苗抗体水平较低或无抗体，成为易感群体，一旦有野毒侵入，病毒迅速繁殖，快速传播.因此，要重视保育猪和生长育肥猪PRV疫苗免疫，制定科学的免疫程序，避免生长育肥猪成为PRV免疫空白群体对猪场PRV防控至关重要.

201 1年以来PR发病率在全国明显上升，许多PRV野毒阴性猪场迅速转阳.本调查中的猪场大部分为大型猪场，经产母猪存栏在500～3 000头，每年进行1～3次定期监测，三年间仅有2个猪场一直保持PRV野毒抗体阴性，这和近年来PRV在全国流行趋势相符.通过以上三年检测数据，结合粤北地区近年来猪伪狂犬病发病情况分析，粤北地区规模化猪场当前PRV野毒阳性已经很普遍，但除个别猪场gE阳性率较高，超过20%，甚至达到50%以上外，多数规模化猪场感染压力相对较低，特别是种猪群，gE阳性率大多低于10%，具备净化条件.

研究证明近几年流行的PRV毒株发生了较大变异，毒力也明显增强，现有疫苗对当前流行毒株保护力下降［10-12］，但生产实践中证明，在尚未有更新型的PRV疫苗面世前，利用现有疫苗和检测技术，通过制定科学合理的免疫程序，提高猪群疫苗抗体水平，增强整个猪群对PRV野毒感染抵抗力，也可以有效防控PR，做到感染不发病，降低因PR流行带来的经济损失.

［1］殷震,刘景华.动物病毒学[M].北京:科学出版社,1997.

［2］常洪涛,刘慧敏,郭达占,等.河南省及周边省份猪群中大面积感染猪伪狂犬病毒的病因分析[J].病毒学报,2014,30（4）:441-449.

［3］郑辉,刘爽,董雅琴,等.2015年我国部分地区猪伪狂犬病血清学调查[J].中国动物检疫,2016,33（9）:38-39.

［4］何启盖,童光志,杨汉春,等.猪伪狂犬病流行病学特征、净化技术及其应用示范[J].中国畜牧杂志,2015,51（24）:68-74.

［5］唐小明,王昌建,林源,等.2014-2015年湖南省规模猪场猪伪狂犬病血清学调查[J].动物医学进展,2016,37（7）:123-126.

［6］戴爱玲,范克伟,李晓华,等.闽西南地区部分规模化猪场猪伪狂犬野毒感染的血清流行病学调查[J].安徽农业大学学报,2015,43（1）:51-55.

［7］钟舒红,胡帅,李军,等.2012-2014年广西部分地区猪伪狂犬病野毒株感染血清学调查[J].黑龙江畜牧兽医,2016,43（4）:122-124.

［8］占鹤松,刘华,周迎春,等.安徽省规模化种猪场猪伪狂犬病血清学调查[J].动物医学进展,2015,36（3）:124-127.

［9］李段.广东省猪伪狂犬病血清学调查及带毒情况的研究[D].郑州：河南农业大学,2015.

［10］彭金美,安同庆,周鸿远,等.猪伪狂犬病病毒新流行株的分离鉴定及抗原差异性分析[J].中国预防兽医学报,2013,35（1）:1-4.

［11］李宁,吴志明,闫若潜,等.2012-2014年河南省猪伪狂犬病病毒gE基因和TK基因的遗传变异分析[J].中国兽医学报,2016,36（10）:6531-1657.

［12］魏春华,戴爱玲,李晓华,等.福建省猪伪狂犬病病毒新流行株gD、gE基因遗传变异分析[J].中国兽医杂志,2016,52（3）:15-18.

Serological Investigation and Analysis of Porcine Pseudorabies in Scale Pig Farms of Northern Guangdong from 2014 to 2016

NAN Wen-jin,HUANG Jian-qiang,WU Jing-bo,HU Hong-hui,PENG Guo-liang
（Laboratory of Animal Disease，Shaoguan University,Shaoguan 512005,Guangdong,China）

To understand the porcine Pseudorabies(PRV)wild strain infection and vaccine immune effect in northern Guangdong region,a total of 3 895 serum samples obtained from 25 large-scale pig farms,serum samples were tested for PRV-gE or PRV-gB antibody by ELISA method.The monitoring data showed that PRV wild strain infection rate of pig farms was 78.57%,77.78%,64.71%in the year of 2014,2015 and 2016 respectively,and samples wild strain positive rates were 7.02%,9.72%and 10.44%.From 2014 to 2016,PRV wild strain infection was a significant difference between boars,multiparity sows,gilt,nursery pig and growing-finishing pigs,gE antibody total positive rate were 11.72%,10.3%,9.49%,4.89%and 14.61%,PRV gB antibody positive rate were 96.55%,98.97%,92.4%,65.23%and 35.79%in these swine herds.The results indicated that scale pig farms with PRV wild strain infection were widespread in northern Guangdong region,the overall positive rate was relatively low,and PRV vaccine immune antibody level were higher in breeding herds,but in nursery pig and growing-finishing pigs vaccine antibody level were lower,and these pigs would become high-risk groups with wild strains infection.

swine；PRV；gE antibody；gB antibody,investigation and analysis

S852.5+3

A

1007-5348（2017）09-0071-04

2017-06-22

广东省科技计划项目（2016A040402038）；广东省现代农业科技创新联盟建设项目（2016LM1141）；韶关市科技计划项目（2013CX/N09）.

南文金（1981-），男，河南灵宝人，韶关学院动物疫病实验室助理研究员，硕士；研究方向：动物传染病防控技术.

（责任编辑：闫文龙）