骨髓间充质干细胞促进糖尿病大鼠骨折愈合的研究

常瑞明 王鹏 杨涛 陈锦武 常建星

骨髓间充质干细胞促进糖尿病大鼠骨折愈合的研究

常瑞明1王鹏2杨涛2陈锦武1常建星3*

目的 检测促炎因子TNF⁃α、IL⁃6及抗炎因子IL⁃4、IL⁃10以及Toll样受体4在骨髓间充质干细胞促进糖尿病大鼠骨折愈合过程中的动态变化，探讨炎症失衡在此过程中的作用及可能机制。方法 7～8周龄SPF级雄性自发性2型糖尿病GK大鼠56只，喂养高脂饲料造模。造模成功后（随机血糖≥11.1 mmol/L）暴露大鼠左侧股骨，人为造成开放性骨折并给与克氏针复位内固定，将培养收集浓缩的骨髓间充质干细胞注射于骨折周围肌肉软组织，于实验后第1周、3周、6周、8周分别行X线摄片、下腔静脉取血测定炎症因子、骨折局部软组织检测TLR4表达。结果 术后第1周、3周、6周、8周对照组TNF⁃a、IL⁃6、TLR⁃4表达均高于实验组（P＜0.05），而IL⁃4、IL⁃10则低于实验组（P＜0.05）；两组动物在手术后第三周均可见骨折处骨痂生长，实验组更加明显，但对照组骨痂不均匀，骨密度较低。结论 骨髓间充质干细胞局部移植可以降低GK糖尿病大鼠骨折后机体的炎症反应，促进骨折愈合。

骨髓间充质干细胞；GK糖尿病大鼠；炎症反应因子；Toll样受体4；骨折愈合

1 材料与方法

1.1 实验动物及主要试剂

GK大鼠60只，雄性，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司，许可证号码（SCXK（沪）2012⁃2002；高脂饲料购于上海普路腾生物科技有限公司；骨髓间充质干细胞购于Cyagen Biosciences Inc.兔抗鼠 TLR4抗体购于 Cell Signaling（Boston，MA，US）；内 参 抗 ⁃GAPDH 购 于 USBiological（Swampscott，MA，US）；鼠 TNF⁃α、IL⁃6、IL⁃4、IL⁃10 ELISA Kit购于达科为生物技术公司。

1.2 实验方案

雄性7～8周龄GK大鼠给于高脂饲料喂养2周，测随机血糖≥11.1 mmol/L认为造模成功。……