张小宁 程继军
摘 要 通过查找文献综合总结家兔DIC实验的实验方法,确定实验方案,进行复制家兔DIC的病理生理实验模型,经過几次实验失败,主要难点就在于给药的速度,如何能保证家兔在实验中存活,通过多次实验改进,总结失败原因,最终确定兔脑粉浓度为2%,注射时间从15min延长至45min,最终实验结果经过检测出现DIC的结果。
关键词 弥散性凝血 DIC 兔脑粉
中图分类号:R364.1 文献标识码:A
1手术操作
(1)取2只家兔并称重,分成甲兔和乙兔。
(2)甲兔和乙兔均从耳缘静脉注入3%戊巴比妥钠1ml/kg麻醉,仰卧固定在家兔手术台上。剪去颈部被毛,沿颈正中做切口,分离皮肤与肌肉。
(3)甲兔从耳缘静脉注射4%兔脑粉生理盐水溶液2ml/kg,15min内注完。重复上述放血步骤,分离血浆备用。
(4)30min后,重复上述放血步骤,分离血浆备用。乙兔从耳缘静脉注射生理盐水2ml/kg,分别在相应时间点按上述方法取血,分离血浆备用。
(5)DIC指标的检测。
①凝血酶原时间的测定:取血浆0.1ml,放入装有4%兔脑粉0.1ml的小试管内,置于37℃水浴。随后加入0.025mol/L的氯化钙0.1ml,用秒表计时,轻轻地摇动。直至溶液停止流动或出现不溶颗粒,记录时间为凝血酶原时间。重复3次,取平均值。
②凝血酶时间的测定:取被检血浆0.2ml放入小试管中,置于37℃水浴。加入适当浓度的凝血酶悬液0.2ml,开动秒表,轻轻地摇动。直至溶液停止流动或出现不溶颗粒,记录时间为凝血酶时间。重复3次,取平均值。
③3P实验:取被检血浆0.2ml,放入小试管中,加入1%硫酸鱼精蛋白溶液0.1ml。轻轻摇匀,室温下放置30min。随后将试管轻轻摇动,有白色纤维或凝块出现的为阳性。……