FMDV、BTV、PPRV多重RT-PCR检测方法的建立

何亚鹏，张 琪，徐丽美，庞文静，付明哲，许信刚

(西北农林科技大学 动物医学院，陕西杨凌 712100)

FMDV、BTV、PPRV多重RT-PCR检测方法的建立

何亚鹏，张 琪，徐丽美，庞文静，付明哲，许信刚

(西北农林科技大学 动物医学院，陕西杨凌 712100)

为建立能够同时检测并鉴别口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus，FMDV)、蓝舌病病毒(Bluetongue virus，BTV)和小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus，PPRV)感染的多重RT-PCR(反转录-聚合酶链式反应，Reverse transcription-polymerase chain reaction)方法，根据3种病毒的基因组全序列和保守区序列设计 3 对特异性引物，优化反应体系和扩增条件，建立能够同时检测 3 种病毒的多重RT-PCR方法。结果表明，建立的多重RT-PCR检测方法敏感性强，对FMDV、BTV和PPRV的核酸最低检测量分别为15.42、6.29、16.50 ng/μL；特异性试验结果表明所建立方法的特异性良好。建立的多重RT-PCR方法具有敏感性高、特异性强、重复性好、快速简便等特点，可以用于临床上 3 种病毒感染的诊断和鉴别。

口蹄疫病毒；蓝舌病病毒；小反刍兽疫病毒；多重RT-PCR

口蹄疫、蓝舌病、小反刍兽疫分别是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus，FMDV)、蓝舌病病毒(Bluetongue virus，BTV)、小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus，PPRV)引起的动物急性传染病，这 3 种病毒都可以引起反刍动物发病，且发病率高，并能够形成大范围流行，均被世界动物卫生组织(OIE)列为法定报告的动物疫病[1-3]，在中国被列为一类动物疫病[4]。临床上存在 3 种病毒混合感染，患畜均表现出精神沉郁，体温升高，口腔黏膜、乳头和蹄部冠状带等处发生水泡及溃疡，临床症状极为相似[5-7]。目前对这 3 种疫病的诊断多采用病原分离鉴定及常规的血清学方法，所需时间较长，普通PCR检测需要不同的反应体系，耗时费力。……