1株猪鼻支原体特异性单克隆抗体的制备及鉴定

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·论著·

1株猪鼻支原体特异性单克隆抗体的制备及鉴定

田瑞雨1,4，熊祺琰1，倪博1，王佳1,2，韦艳娜1，冯志新1，邵国青1,3

目的制备与鉴定猪鼻支原体单克隆抗体，用于猪鼻支原体诊断及致病机理的研究。方法将猪鼻支原体全菌蛋白免疫小鼠，利用杂交瘤技术制备单克隆抗体。鉴定其抗体亚型并对纯化单抗的效价、特异性进行鉴定。将该单抗用于菌落免疫杂交试验、间接免疫荧光试验。结果获得了1株猪鼻支原体单抗，命名为Mhr-08。该单抗的亚型属于IgG1，轻链为κ型。ELISA测定该纯化单抗效价为1∶102 400，Western-blot检测结果表明，该单抗与猪鼻支原体全菌蛋白在43 kDa处出现特异性反应条带，与猪其他支原体、大肠杆菌及KM2培养基无交叉反应；该单抗为猪鼻支原体表面膜蛋白抗体，可成功应用于菌落免疫杂交试验；将其用于间接免疫荧光试验可成功检测出黏附于猪气管上皮细胞上的猪鼻支原体。结论成功制备和鉴定出1株猪鼻支原体单克隆抗体，该特异性单抗的获得为猪鼻支原体的诊断及致病机理的研究提供了工具。

猪鼻支原体；单克隆抗体；特异性

猪鼻支原体(Mycoplasmahyorhinis)是猪呼吸道中存在的一种常见病原菌[1]，可引起猪的关节炎、结膜炎、中耳炎、咽鼓管炎及肺炎等多种慢性炎症[2-7]，通常由母猪或大猪经呼吸道传染给小猪，进而从呼吸道侵染全身引发疾病的发生。猪鼻支原体也是实验室细胞培养物的常见污染物[8]，同时近年来研究者发现猪鼻支原体与人胃癌、大肠癌有高度相关性，并已经从胃癌组织中直接分离到了猪鼻支原体[9]，而且Namiki等人发现猪鼻支原体可诱导肿瘤细胞恶性程度增加[8]，Duan等人发现它还可以促进肿瘤细胞迁移[10]。……