输血传播病毒PCR-DHPLC检测技术的建立及初步应用

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·论著·

输血传播病毒PCR-DHPLC检测技术的建立及初步应用

杨春华,廖芸,罗秋红,孙思扬,夏彪，祝建新

目的应用聚合酶链式反应(PCR)结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测输血传播病毒。方法根据输血传播病毒的核酸序列特点设计特异性引物进行PCR，将扩增产物进行DHPLC检测分析,以验证方法的灵敏度、特异性、重复性，同时进行临床检测的初步应用。结果以乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒进行特异性试验，无交叉反应，具有较好的特异性；重复性良好；灵敏度可达1.0×101拷贝/反应。分别应用实时荧光PCR法、普通PCR法及本文所建立的PCR-DHPLC法同时检测32份血清样本，发现有17份样本实时荧光PCR阳性，17份样本PCR-DHPLC阳性，15份普通PCR阳性。结论本文建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、重复性好等优点，可用于输血传播病毒感染的分子流行病学调查。

输血传播病毒；PCR-DHPLC；实时荧光PCR

Torque Teno virus首次发现于1997年，其存在于输血后感染肝炎(非甲-戊型)的病人血清中，因此该病毒被命名为输血传播病毒，曾一度被认为这是一种新型肝炎病毒，对人引起不同程度的肝损伤[1]。之后，各国科研人员陆续于在不同的哺乳动物体内发现该病毒[2]，证实其是一种人兽共患病。输血传播病毒可通过多种途径传播，在人群中感染率较高，各国学者经过大量研究证明，输血传播病毒像戊型肝炎病毒一样呈全球流行分布[3]。该病毒确切的致病机理尚不明确，不过大部分研究认为其可能与肝脏疾病、肺部疾病及血液疾病相关[4]。

输血传播病毒是指环病毒科(Anelloviridae)的成员，无囊膜，是一种单股负链环状小DNA病毒，病毒粒子为二十面体，直径30～32 nm[1]。……