玉米干种子基因组DNA提取方法的改进

董永军 ，王陆军 ，郝建平 ，王艳梅 ，李培良 ，王创云 ，邓艳芳 ，周 琼 ，李志敏，庞 冰，张婷婷

玉米干种子基因组DNA提取方法的改进

董永军1，王陆军2，3，郝建平1，王艳梅2，3，李培良2，3，王创云2，3，邓艳芳3，周 琼3，李志敏3，庞 冰1，张婷婷1

（1.山西大学生命科学学院，山西太原030006；2.山西省农业科学院作物科学研究所，山西太原030031；3.山西省玉米工程技术研究中心，山西太原030031）

为了实现玉米干种子基因组DNA快速提取，针对玉米干种子淀粉含量高的特点，对传统核酸CTAB提取方法进行了优化与改良，将提取的DNA进行分光光度计及琼脂糖凝胶电泳检测。结果显示，DNA的OD260/OD280值为1.79～1.95，OD260/OD230值为1.90～2.15；琼脂糖凝胶电泳图谱清晰，条带无拖尾现象，说明采用改良方法提取的DNA质量高、无降解。以改良方法提取的DNA样品作为模板进行分子标记检测试验，结果清晰稳定，进一步证明采用改良CTAB法直接从玉米干种子中提取的DNA可以满足SSR和SNP等分子试验的要求。

玉米；干种子；DNA；CTAB

近年来，随着分子育种技术的发展与应用，玉米育种进程显著加快，分子育种越来越受到广大研究者的青睐。提取高质量的核酸是进行玉米分子育种研究的基础，核酸的质量对下游分子试验的影响至关重要。

目前，常用来提取植物基因组DNA的方法有CTAB 法[1-3]、SDS 法[4-5]、酶法[6]和高盐提取法[7]等。其中，CTAB法仍被许多实验室用来提取玉米基因组DNA，提取材料一部分是玉米嫩叶，提取DNA时需要进行发芽、液氮研磨，费时费力；另一部分是玉米干种子，提取周期长，质量欠佳。分子育种研究的样品材料多数为干种子，而其中含有大量的多糖、淀粉、蛋白质等物质[8]，如何快速有效地去除这些物质，从玉米干种子中提取到高质量的基因组DNA，是分子育种研究的关键技术。……