MMP-9、EGFR和E-cadherin的表达与乳腺癌的相关性

张安文

（广西科技大学第二附属医院病理科，广西 柳州 545000）

MMP-9、EGFR和E-cadherin的表达与乳腺癌的相关性

张安文

（广西科技大学第二附属医院病理科，广西 柳州 545000）

目的：研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、表皮生长因子受体（EGFR）和E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达与乳腺癌的相关性。方法：选取2010年2月至2014年5月期间在广西科技大学第二附属医院病理科接受检查的50例乳腺癌患者和20例乳腺增生患者作为本次研究的对象。将其按病理标本采集方式的不同分为乳腺癌组（包含50例乳腺癌患者，其病理标本均来自其癌灶）、癌旁正常乳腺组（包含20例未发生淋巴结转移的乳腺癌患者，其病理标本均来自其癌灶旁正常的乳腺组织）、乳腺增生组（包含20例乳腺增生患者）。采用免疫组织化学 S-P 法检测这三组患者病理标本中EGFR、MMP-9和E-cadherin的表达水平，分析该检测结果与乳腺癌发生、发展及转移的相关性。结果：三组患者病理标本中E-cadherin的阳性率相比差异无统计学意义（P＞0.05）。乳腺癌组患者病理标本中EGFR的阳性率低于癌旁正常乳腺组和乳腺增生组患者，其病理标本中MMP-9的阳性率高于癌旁正常乳腺组和乳腺增生组患者，差异具有统计学意义（P＜0.01）。发生淋巴结转移的乳腺癌患者病理标本中EGFR和MMP-9的阳性率均高于未发生淋巴结转移的患者，差异具有统计学意义（P＜0.05 ）。结论：MMP-9、EGFR的表达水平与乳腺癌的发生、发展密切相关。对乳腺癌患者进行EGFR和MMP-9联合检测可判断其是否发生了淋巴结转移。E-cadherin的表达水平与乳腺癌的发生及乳腺癌患者是否发生淋巴结转移均无关联。

EGFR；MMP-9；E-cadherin；乳腺癌；淋巴结转移

乳腺癌是常见的恶性肿瘤之一。近年来，该病在我国的发病率呈逐年升高的趋势。进行早期诊断和治疗是降低该病患者死亡率的关键[1]。基质金属蛋白酶-9（MMP-9）具有降解细胞外基质（主要是Ⅳ型胶原）、破坏基膜、促进肿瘤侵袭与转移的作用。有报道显示，MMP-9可在乳腺癌、胃癌及甲状腺癌等多种肿瘤中呈过度表达，并参与肿瘤细胞的增殖、脉管的生成和浸润转移等过程，其与肿瘤的发生及发展密切相关。E-钙黏蛋白（E-cadherin）是一类钙离子依赖性跨膜糖蛋白，主要存在于人体的乳腺、胃上皮与甲状腺等非神经性上皮组织中。E-cadherin主要介导同源细胞间的黏附，维持细胞极性和组织结构的完整性。有研究结果表明[2]，机体中缺失E-cadherin可导致细胞间黏附能力的下降，从而引起肿瘤的发生、侵袭和转移。表皮生长因子受体（EGFR）是一种常见的表皮生长因子，属于酪氨酸激酶跨膜受体蛋白。EGFR在促进肿瘤细胞的增殖、血管的生成、肿瘤的侵袭与转移等方面均发挥重要的作用。目前，临床上关于EGFR、MMP-9和E-cadherin表达与乳腺癌相关性的研究较少。在本次研究中，广西科技大学第二附属医院病理科通过对该院在2010年2月至2014年5月期间收治的50例乳腺癌患者和20例乳腺增生患者的临床资料进行回顾性分析，探讨EGFR、MMP-9和E-cadherin表达与乳腺癌的相关性，以期为乳腺癌的诊断与治疗提供科学的参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

本次研究的对象为2010年2月至2014年5月期间在广西科技大学第二附属医院确诊的50例乳腺癌患者和20例乳腺增生患者。这70例患者均经肿块切除活检术或术前空芯针穿刺术确诊患有乳腺癌及乳腺增生，均为女性患者，其临床资料完整。在50例乳腺癌患者中，有47例浸润性导管癌患者，3例浸润性小叶癌患者；其中，有30例发生淋巴结转移的患者，20例未发生淋巴结转移的患者；其年龄介于23～68岁之间，平均年龄为（48.7±12.9）岁。20例乳腺增生患者的年龄介于22～67岁之间，平均年龄为（49.6±4.5）岁。按病理标本采集方式的不同将这70例患者分为乳腺癌组（包含50例乳腺癌患者，其病理标本均来自其癌灶）、癌旁正常乳腺组（包含20例未发生淋巴结转移的乳腺癌患者，其病理标本均来自其癌灶旁正常的乳腺组织）、乳腺增生组（包含20例乳腺增生患者）。这三组患者的病理标本检查结果均由两名副高职称的病理科医生进行复检。这70例患者在参与本次研究前均无放疗、化疗及内分泌治疗史。

1.2 试剂及方法

本次研究使用的抗体和试剂包括鼠抗人MMP-9、EGFR、E-cadherin单克隆抗体、SP免疫组化染色试剂盒和DAB显色剂等，均购自福州迈新公司。采用免疫组化S-P染色法检测这三组病理标本中MMP-9、EGFR和E-cadherin的表达情况。所有的病理标本切片均经微波抗原修复。按照试剂盒及仪器说明书进行免疫组化染色操作。用已知的阳性乳腺癌组织作为阳性对照，用PBS液代替一抗作为阴性对照。

1.3 观察指标

观察MMP-9、EGFR和E-cadherin表达与乳腺癌发生、发展及转移的相关性。MMP-9、EGFR和E-cadherin的主要着色部位为细胞质或细胞膜。以病理标本的细胞质或细胞膜中出现棕黄色颗粒作为阳性判定标准。其中，阴性表达：指细胞质或细胞膜中无阳性细胞或阳性细胞的计数＜5%；阳性表达：指细胞质或细胞膜中的阴性细胞计数≥5%。

1.4 统计学方法

使用SPSS15.0统计学软件对本次研究中的数据进行统计学分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，采用t检验，计数资料用百分比（%）表示，采用X2检验，两变量的相关性用 Spearman进行相关性分析。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三组患者病理标本中EGFR、MMP-9和E-cadherin表达阳性率的对比

三组患者病理标本中E-cadherin的阳性率相比差异无统计学意义（P＞0.05）。乳腺癌组患者病理标本中EGFR的阳性率低于癌旁正常乳腺组和乳腺增生组患者，其病理标本中MMP-9的阳性率高于癌旁正常乳腺组和乳腺增生组患者，差异具有统计学意义（P＜0.01）。乳腺增生组患者与癌旁正常乳腺组患者病理标本中EGFR的阳性率相比差异无统计学意义（P＞0.05）。详见表1。

2.2 EGFR、MMP-9和E-cadherin表达与乳腺癌淋巴结转移的相关性

在乳腺癌组的50例患者中，发生淋巴结转移与未发生并淋巴结转移的患者其病理标本中E-cadherin的阳性率相比差异无统计学意义（P＞0.05 ）。发生淋巴结转移的患者病理标本中EGFR和MMP-9的阳性率均高于未发生淋巴结转移的患者，差异具有统计学意义（P＜0.05 ）。详见表2。

表1 三组患者病理标本中EGFR、MMP-9和E-cadherin表达阳性率的对比

表2 EGFR、MMP-9和E-cadherin表达与乳腺癌淋巴结转移的相关性

2.3 MMP-9和EGFR表达与乳腺癌的相关性

50例乳腺癌患者病理标本中MMP-9和EGFR的表达呈正相关（X2=6.44，r=0.302）。详见表3。

表3 MMP-9和EGFR表达与乳腺癌的相关性

2.4 EGFR和E-cadherin表达与乳腺癌的相关性

50例乳腺癌患者病理标本中EGFR和E-cadherin的表达呈负相关（X2=5.19，r=-0.279）。详见表4。

表4 EGFR和E-cadherin表达与乳腺癌的相关性

2.5 MMP-9和E-cadherin表达与乳腺癌的相关性

50例乳腺癌患者病理标本中MMP-9和E-cadherin的表达呈负相关（X2=16.15，r=-0.279）。详见表5。

表5 MMP-9和E-cadherin表达与乳腺癌的相关性

3 讨论

肿瘤从原位增殖到侵袭转移是一个复杂的过程。肿瘤细胞具备降解细胞外基质的能力是其中的关键。MMP-9具有降解细胞外基质、破坏基膜、促进肿瘤侵袭和转移的作用，与肿瘤的发生和发展密切相关[3]。E-cadherin是钙黏素家族中的一员，其可通过介导同源细胞间的黏附，维持细胞极性和组织结构的完整性。E-cadherin的缺失可导致细胞间黏附能力的下降，从而促进肿瘤的发生、侵袭和转移。不过，临床上对E-cadherin的表达与乳腺癌淋巴结转移的相关性尚存在争议。时志民等[4]认为，E-cadherin在乳腺癌患者的病理组织中呈低表达，且与乳腺癌的淋巴结转移相关。谭敏华等[5]则认为，E-cadherin在乳腺癌患者病理组织中的表达与乳腺癌的淋巴结转移无关。EGFR属于原癌基因的产物，是单个跨膜螺旋的酪氨酸蛋白激酶受体，其在促进肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭与转移等方面发挥重要的作用。杨迎旭等[6-7]的研究表明，EGFR在分化差或伴有转移的恶性肿瘤中呈过度表达。赵颖海等[8]的研究发现，MMP-9参与了乳腺癌的发生和演化进展的过程，其在发生和未发生淋巴结转移的乳腺癌患者病理组织中的阳性率存在显著差异。李治等[9]的报道指出，MMP-2和MMP-9的高表达与NSCLC 的侵袭、转移密切相关。

综上所述，MMP-9、EGFR的表达水平与乳腺癌的发生、发展密切相关。对乳腺癌患者进行EGFR和MMP-9联合检测可判断其是否发生了淋巴结转移。E-cadherin的表达水平与乳腺癌的发生及乳腺癌患者是否发生淋巴结转移均无关联。

[1]马吉光.MAPK及SNAIL蛋白在“三阴”型乳腺癌中的表达及其意义[D].宁夏医科大学,2014,2(15):37-38.

[2]刘力.联合检测MMP-9及E-cadherin在乳腺癌中表达变化的研究[D].南华大学,2013,4(6):52-53.

[3]谭米多.MMP-9和E-cadherin在乳腺癌中的表达及其临床意义[J].肿瘤药学,2013,3(16):180-184.

[4]时志民.乳腺癌中EBP50、E-cadherin和β-catenin的表达及意义[J].中国实验诊断学,2013,14(14):1558-1560.

[5]谭敏华,雷伟华,谭冬玲,等．浸润性乳腺癌ER、PR、HER-2、E-cadherin、CK5/6检测与临床预后关系[J].临床与实验病理学杂志,2013,27(9):933-938.

[6]杨迎旭.EGFR和NEDD9在人乳腺癌组织中的表达及其临床意义[D].郑州大学,2013,3(18):42-43.

[7]谭米多.E-cadherin和Bcl-2在乳腺癌中的表达及其临床意义的研究[D].南华大学,2013,4(16):66-67.

[8]赵颖海.VEGF、MMP-2、MMP-9在乳腺癌组织中的表达及其对侵袭和转移的影响[J].临床与实验病理学杂志,2013,24(2):154-157.

[9]李治,帅晓明,黄韬．MMP-2、MMP-9 在乳腺癌转移中作用的研究[J]华西医学,2013,21(1): 43-44.

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