过氧乙酸对中华绒螯蟹及池塘生物的毒性研究

郑 串，潘连德

( 上海海洋大学，省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室，上海 201306 )

过氧乙酸对中华绒螯蟹及池塘生物的毒性研究

郑 串，潘连德

( 上海海洋大学，省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室，上海 201306 )

水温(20±1) ℃下， 采用静态生物毒性试验的方法，研究了过氧乙酸对中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹、幼蟹、日本沼虾及伊乐藻、金鱼藻和苦草的毒性。试验结果表明，过氧乙酸对中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹的24、48、72 h和96 h的半致死质量浓度分别为39.36、34.36、30.55 mg/L和28.05 mg/L，安全质量浓度为7.86 mg/L；对中华绒螯蟹幼蟹的24、48、72 h和96 h的半致死质量浓度分别为43.55、40.70、36.53 mg/L和31.60 mg/L，安全质量浓度为10.67 mg/L，过氧乙酸对日本沼虾的24、48、72 h和96 h的半致死质量浓度分别为17.14、14.98、12.02 mg/L和9.50 mg/L，安全质量浓度为3.43 mg/L。根据安全质量浓度可知，对过氧乙酸的耐受性顺序为中华绒螯蟹幼蟹>Ⅲ期仔蟹>日本沼虾。过氧乙酸对伊乐藻、金鱼藻和苦草的96 h半有效质量浓度分别为20.13、39.78 mg/L和33.67 mg/L，因此，在蟹塘使用过氧乙酸消毒时，用量需控制在3.43 mg/L以下，防止过氧乙酸的药害。

急性毒性；过氧乙酸；安全质量浓度

过氧乙酸，别名过醋酸、过氧化乙酸，是过氧有机酸中结构简单，容易合成，相对稳定性较好的高活性、强氧化性有机酸，广泛用作高效消毒剂[1-2]。过氧乙酸体积分数不低于0.005%时，在1 min内能杀灭细菌繁殖体，0.05%的过氧乙酸，可在10 s内杀死葡萄球菌(Staphylococcus)噬菌体，对多种细菌、病毒和真菌都有较强的抑杀效果[3-5]。比传统消毒剂更高效、广谱、快速杀灭各种微生物，且无有害残留物[6-8]，广泛应用于医药、食品、畜牧等领域[9-10]，如医疗设备消毒[11-12]、食品包装消毒[13]、杀灭多种畜禽病毒[14-15]等。近年来，在水产养殖业中也开始推广应用过氧乙酸[16-17]防治鱼苗鳃霉病、多子小瓜虫(Ichthyophthiriusmultifiliis)、有害单胞藻和嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)等水产致病菌[1,18]。

中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)是我国淡水养殖的优势蟹种[19]。近年来，在主养中华绒螯蟹的池塘中套养日本沼虾(Macrobrachiumnipponense)已成为一种发展趋势，可以显著提高产量[20]。但随着养殖产量的提高，病害防控尤为重要。在蟹塘病害防治过程中，经验性、随意性、过量用药等不合理用药致死现象时有发生[21]，过氧乙酸作为一种绿色环保的水产消毒剂，在进行中华绒螯蟹养殖水体消毒时不仅要注重消毒效果，还要考虑对中华绒螯蟹、日本沼虾和池塘水草的影响。目前，尚未见过氧乙酸对中华绒螯蟹、日本沼虾和池塘水草影响的研究报道，为此，本试验研究了过氧乙酸对中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹、幼蟹、日本沼虾及伊乐藻(Elodeanuttallii)、金鱼藻(Ceratophyllumdemersum)和苦草(Vallisnerianatans)的毒性。

1 材料与方法

1.1 材料

试验所用中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹、幼蟹、日本沼虾、伊乐藻、金鱼藻和苦草均取自上海市崇明县某中华绒螯蟹养殖场。中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹和幼蟹的体质量分别为(0.06±0.01) g和(3.26±0.11) g，日本沼虾为(1.44±0.11) g，暂养7 d后用于试验，试验前2 d停食。

试验用水为蟹场养殖用水，水温(20±1) ℃，pH 7.30±0.10，溶解氧(5.00±0.30) mg/L，总氨氮(0.08±0.01) mg/L，试验容器均为25 cm×30 cm×30 cm的玻璃缸。

过氧乙酸(15%)由索尔维有限公司提供，丙酮(分析纯)和碳酸镁(分析纯)均购自国药集团化学试剂有限公司。试验开始前,配制过氧乙酸母液，再根据需要配制成不同的质量浓度，所添加母液体积不超过试验用水的5‰[22],过氧乙酸需现配现用。

1.2 方法

根据预试验结果，按等对数间距设定质量浓度梯度，每组设3个重复。采用静态生物毒性试验方法[23]，在玻璃缸中加入18 L试验用水，加入母液配制成试验药液，对照组加入等体积的试验用水，每个试验缸中放入健康的试验对象8只(尾),并放置消毒过的瓦片作为遮蔽物，置于阴凉通风处进行试验，每24 h更换一次相同质量浓度的药液，试验周期为96 h。前24 h进行连续观察，试验过程中每隔4 h测量一次水体溶解氧和水温[23],以后记录每组的24、48、72 h和96 h死亡数,及时捞出死亡个体。以玻璃棒轻触腹部不产生应激反应为死亡标准[24]。

每个试验缸底铺入池塘取回的泥沙5 cm，植入鲜质量为(10.00±0.10) g，根系完整、长势良好的水草，光暗比为12 h∶12 h ，光照度2000 lx，加入母液配制成试验药液，对照组加入等体积的试验用水，试验组每24 h更换一次相同质量浓度的药液。测水草叶绿素a的含量和质量损失率,水草叶绿素a含量测定采用丙酮法[25]。

1.3 数据处理

试验数据采用寇氏法[24]计算半致死质量浓度(LC50)、安全质量浓度(SC)和半致死质量浓度的95%的置信区间，并做试验质量浓度对数(x)和死亡率(y)的回归方程。计算公式如下：

LogLC50=Xm-d(∑p-0.5)

SC=48 h LC50×0.3/(24 h LC50/48 h LC50)2

LogLC50的95%置信限=LogLC50±1.96×d[∑(p×g/n)]1/2

式中，Xm为最大剂量的对数，d为相邻剂量组比值的对数，p为死亡率，∑p为各组死亡率之和，g为存活率，n为每组受试对象数目。

折损率/%=(起始质量-终末质量)/起始质量×100%

叶绿素a含量的计算参照国家标准[26]进行。

试验数据用SPSS 17.0进行单因素方差分析，Duncans法进行多重比较，显著性水平为0.05[27]。

2 结 果

2.1 过氧乙酸对中华绒螯蟹的毒性

试验过程中，前24 h的连续观察发现，中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹和幼蟹在不同质量浓度的过氧乙酸环境中分别表现出了不同程度的中毒症状(图1a～b)。当处于低质量浓度过氧乙酸条件下时，活动情况与对照组无明显差异。自23.70 mg/L用量开始，中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹开始表现出不适，狂躁不安，向四周乱爬，个别停止运动，安静地死去，在药物质量浓度达到35.56 mg/L时，中华绒螯蟹幼蟹表现出相同的中毒症状，随着药物质量浓度不断提高，中毒症状愈发明显，死亡的中华绒螯蟹仔蟹和幼蟹背甲发黄，沉入水底。用玻璃棒轻触腹部没有应激反应。

2.1.1 过氧乙酸对中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹的毒性

24 h时过氧乙酸质量浓度23.70 mg/L组的中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹开始死亡，在80.00 mg/L的质量浓度条件下胁迫72 h全部致死，随着过氧乙酸质量浓度的增加，Ⅲ期仔蟹的死亡率明显上升，胁迫时间越长，死亡率越高(表1)。过氧乙酸对Ⅲ期仔蟹胁迫24 h的半致死质量浓度为39.36 mg/L，当胁迫时间延长到48、72 h和96 h时，半致死质量浓度分别为24 h的87.30%、77.62%和71.27%，表明随着过氧乙酸胁迫时间的延长，对Ⅲ期仔蟹的毒性也越大(表2)。统计结果表明，过氧乙酸对中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹的安全质量浓度为7.86 mg/L。

2.1.2 过氧乙酸对中华绒螯蟹幼蟹的毒性

24 h时过氧乙酸质量浓度23.70 mg/L组的中华绒螯蟹幼蟹开始死亡，在80.00 mg/L的质量浓度条件下胁迫96 h全部致死，随着过氧乙酸质量浓度的增加，幼蟹的死亡率明显上升，胁迫时间越长，死亡率越高(表1)。过氧乙酸对中华绒螯蟹幼蟹胁迫24 h的半致死质量浓度为 43.55 mg/L，当胁迫时间延长至48、72 h和96 h时，半致死质量浓度分别为24 h的93.46%、83.89%和72.56%。随着过氧乙酸胁迫时间的延长，对中华绒螯蟹幼蟹产生的毒性也越大(表2)。统计结果表明，过氧乙酸对幼蟹的安全质量浓度为10.67 mg/L。

2.2 过氧乙酸对日本沼虾的毒性

日本沼虾对过氧乙酸的刺激反应较大。开始时日本沼虾急躁狂游，游动毫无方向，四处乱撞，随着胁迫时间的延长，渐渐平静下来，逐渐变成仰游或侧游, 头胸甲与肌肉易分离，体色发白(图1c～d)，身体失去平衡沉底死亡[28]。

24 h时过氧乙酸质量浓度为7.50 mg/L时日本沼虾开始死亡，在25.31 mg/L的质量浓度条件下胁迫96 h日本沼虾全部死亡。随着过氧乙酸胁迫质量浓度的增加，日本沼虾的死亡率明显上升，胁迫时间越长，死亡率越高(表1)。过氧乙酸对日本沼虾胁迫24 h的半致死质量浓度为17.14 mg/L，当胁迫时间延长到48、72 h和96 h时，半致死质量浓度分别为24 h的87.40%、70.13%和55.43%。随着过氧乙酸胁迫时间的延长，对日本沼虾产生的毒性也越大(表2)。统计结果表明，过氧乙酸对日本沼虾的安全质量浓度为3.43 mg/L。

图1 中华绒螯蟹和日本沼虾在过氧乙酸胁迫下的形态变化a为对照组的中华绒螯蟹；b为中毒死亡的中华绒螯蟹；c为对照组的日本沼虾；d为中毒死亡的日本沼虾.

试验对象质量浓度mg/L死亡率/%24h48h72h96h中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹对照组15.8023.7035.5653.3380.00120.000020.8341.6775.0087.50100.0004.1729.1750.0083.3391.67100.0008.3333.3362.5083.33100.00100.00012.5033.3366.6795.83100.00100.00中华绒螯蟹幼蟹对照组15.8023.7035.5653.3380.00120.000012.5033.3366.6787.50100.000016.6741.6766.6791.67100.0004.1716.6750.0079.1791.67100.0008.3329.1750.0091.67100.00100.00日本沼虾对照组5.007.5011.2516.8825.3137.97008.3325.0045.8366.67100.000016.6729.1758.3375.00100.0008.3329.1737.5070.8387.50100.00012.5037.5050.0091.67100.00100.00

2.3 过氧乙酸对水草的毒性

2.3.1 水草形态颜色的变化

试验过程中，随着过氧乙酸含量的增加和胁迫时间的延长，3种水草的形态和颜色均发生了一定的变化(图2)。在35.56 mg/L 的质量浓度下胁迫24 h，伊乐藻的叶片开始由绿变为浅黄色。随着胁迫质量浓度的增加和时间的延长，水草茎也开始由绿变黄，继而转变为白色，叶片则由黄变白，直至全部变白死亡。金鱼藻则在15.80 mg/L的质量浓度下胁迫24 h，就开始由绿变黄。苦草叶片则在23.70 mg/L的质量浓度下胁迫24 h，开始发黄，随着胁迫时间和质量浓度的增加，全部变白死亡。试验结束时，120.00 mg/L质量浓度下，3种水草叶片发白，茎易折断失去韧性，可以认定水草死亡[29]。

2.3.2 水草质量的变化

在过氧乙酸胁迫作用下，3种水草的质量均发生了显著性改变。在15.80 mg/L的质量浓度条件下，伊乐藻和苦草质量损失率开始出现显著性变化，最大质量损失率分别达21.54%和30.72%。金鱼藻的质量损失率则在23.70 mg/L的质量浓度条件下才开始出现显著性变化，最大质量损失率可达41.41%。3种水草随着过氧乙酸胁迫质量浓度的增加和胁迫时间的延长，质量损失率均上升(表3)。

试验对象试验时间h半致死质量浓度mg/L95%置信区间mg/L回归方程相关系数安全质量浓度mg/L中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹2448729639.3634.3630.5528.0531.09～49.8227.11～43.5424.27～38.4622.60～34.83y=0.5168x-1.4094y=0.4933x-1.2651y=0.4785x-1.1606y=0.4697x-1.09280.980.980.970.957.86中华绒螯蟹幼蟹2448729643.5540.7036.5331.6034.65～54.7432.29～51.3129.02～45.9625.38～39.35y=0.5344x-1.5172y=0.5284x-1.4670y=0.5167x-1.3810y=0.5021x-1.26360.990.990.980.9610.67日本沼虾2448729617.1414.9812.029.5013.47～21.8011.70～19.189.30～15.537.55～11.95y=0.4895x-0.8743y=0.4953x-0.8339y=0.4688x-0.6743y=0.4689x-0.57720.980.990.990.963.43

表3 过氧乙酸对水草质量的影响

注: 表中同一列上标不同字母的平均值间差异显著(P<0.05)，标相同字母的平均值间差异不显著(P>0.05)，下同.

2.3.3 水草叶绿素a含量的变化

在试验过程中，3种水草都经历了由绿变黄最后变白的过程，叶绿素a含量也发生了变化。由表4～6可见，金鱼藻、苦草和伊乐藻分别在15.80、23.70 mg/L和35.56 mg/L条件下胁迫24 h，叶绿素a含量开始出现显著性下降，在120.00 mg/L条件下胁迫24 h，叶绿素a含量分别降低为对照组的22.12%、5.53%和13.62%。胁迫质量浓度相同的条件下，随着作用时间的延长，叶绿素a含量下降，3种水草的变化趋势相似。

表4 过氧乙酸质量浓度对伊乐藻叶绿素a含量的影响 μg/g

表5 过氧乙酸质量浓度对金鱼藻叶绿素a含量的影响 μg/g

表6 过氧乙酸质量浓度对苦草叶绿素a含量的影响 μg/g

3 讨 论

3.1 过氧乙酸对中华绒螯蟹的毒性作用

由试验结果可知，过氧乙酸对中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹、幼蟹的96 h半致死质量浓度分别为28.05 mg/L和31.60 mg/L，均属于微毒性；幼蟹的半致死质量浓度大于Ⅲ期仔蟹，这可能与蟹的规格有关。本试验中中华绒螯蟹幼蟹平均体质量(2.256 g)远大于Ⅲ期仔蟹(0.055 g)。有报道指出，耐苯扎溴铵毒性能力中华绒螯蟹幼蟹>Ⅲ期仔蟹>Ⅰ期仔蟹>中华绒螯蟹大眼幼体，表明苯扎溴铵对中华绒螯蟹毒性大小与其个体大小成负相关[30-31]，还有研究表明，耐甲醛毒性能力中华绒螯蟹溞状Ⅳ期>中华绒螯蟹溞状Ⅲ期>中华绒螯蟹溞状Ⅱ期>中华绒螯蟹溞状Ⅰ期[32]，甲醛对中华绒螯蟹的毒性[32]也与本试验结果相似。可见中华绒螯蟹对这些药物的耐受性随个体的增长而变强。

3.2 过氧乙酸对日本沼虾的毒性作用

3.3 过氧乙酸对中华绒螯蟹和日本沼虾的毒性比较

本试验中,中华绒螯蟹和日本沼虾对过氧乙酸表现出不同的耐受性。对过氧乙酸的耐受性为中华绒螯蟹幼蟹>中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹>日本沼虾，中华绒螯蟹表现出更强的耐受性，这可能与生物骨质化程度有关。有研究指出，罗氏沼虾(M.rosenbergii)和中国明对虾(Fenneropenaeuschinensis)对甲醛的耐受性为罗氏沼虾>中国明对虾[34]。通过与中华绒螯蟹进行比较得出，对甲醛的耐受性为中华绒螯蟹>罗氏沼虾>中国明对虾[32]，这与本试验结论相似，由于蟹类身体骨质化程度较高，故表现出了较强的耐受性。

3.4 过氧乙酸对3种水草的毒性作用

本试验对水草的抑制作用主要体现在质量损失率和叶绿素a含量上。比较相同作用时间下，叶绿素a含量最先出现显著性差异的胁迫质量浓度可知，过氧乙酸对金鱼藻的叶绿素a含量胁迫作用更明显。在相同胁迫质量浓度作用下，比较质量损失率最先出现显著性差异可知，过氧乙酸对伊乐藻和苦草的质量变化胁迫作用较金鱼藻敏感。本试验参照已有的研究方法[27],求出过氧乙酸对伊乐藻、金鱼藻和苦草的96 h半有效质量浓度分别为20.13、39.78 mg/L和33.67 mg/L，因此，对过氧乙酸的耐受性顺序为金鱼藻>苦草>伊乐藻。

有研究表明，扑草净对金鱼藻的240 h半有效质量浓度仅为0.13 mg/L[27]。异噻唑啉酮类药物在5 mg/L以上才开始对伊乐藻产生明显的毒害作用[35]，当四环素质量浓度达到4 mg/L时严重破坏了苦草细胞的结构[36]。不同药物对水草毒性作用差异较大，可能与药物作用机理有关。用柠檬酸和乙酸抑制黄丝藻(Tribonemasp.)，通过酸性来破坏叶绿素的结构，藻体颜色由绿变黄再变为白色[37]，这与本试验水草颜色变化相似，表明过氧乙酸可能存在相似的作用机制。3种水草在过氧乙酸的胁迫作用下叶片最先开始变化，可能是过氧乙酸同扑草净作用部位相似，主要作用于植物叶片[38]。

过氧乙酸作为一种绿色环保的消毒剂,今后在水产养殖中应用会越来越广泛[39]。通常认为，水体中有机物含量、温度和酸碱度等均可影响过氧乙酸的消毒效果，降低毒性[40-42]，为全面了解过氧乙酸对其他水生生物的影响及作用机制，还应进行更深入的研究。

4 结 论

过氧乙酸对中华绒螯蟹Ⅲ期仔蟹的24、48、72 h和96 h的半致死质量浓度分别为39.36、34.36、30.55 mg/L和28.05 mg/L，安全质量浓度为7.86 mg/L；对幼蟹的24、48、72 h和96 h的半致死质量浓度分别为43.55、40.70、36.53 mg/L和31.60 mg/L，安全质量浓度为10.67 mg/L；对日本沼虾的24、48、72 h和96 h的半致死质量浓度分别为17.14、14.98、12.02 mg/L和9.50 mg/L，安全质量浓度为3.43 mg/L。根据安全质量浓度的大小，对过氧乙酸的耐受性顺序为中华绒螯蟹幼蟹>Ⅲ期仔蟹>日本沼虾。

过氧乙酸对伊乐藻、金鱼藻和苦草的96 h半有效质量浓度分别为20.13、39.78 mg/L和33.67 mg/L,对过氧乙酸的耐受性顺序为金鱼藻>苦草>伊乐藻。

因此，在套养日本沼虾的池塘中使用过氧乙酸时，使用质量浓度应尽量控制在3.43 mg/L以下，防止过氧乙酸造成药害。

[1] 赵飞，韩刚，谭爱萍，等. 过氧乙酸对小瓜虫幼虫和包囊的杀灭效果[J]. 广东农业科学，2012(15):129-131.

[2] Wagner M，Brumelis D，Gehr R. Disinfection of wastewater by hydrogen peroxide or peracetic acid: development of procedures for measurement of residual disinfectant and application to a physicochemically treated municipal effluent[J]. Water Environment Research，2002，74(1):33-50.

[3] 黄育红，林立旺，陈路瑶，等. 过氧乙酸杀灭微生物效果及稳定性实验观察[J]. 海峡预防医学杂志，2000(4):43-59.

[4] 张黎. 过氧乙酸戊二醛复方消毒剂含量测定方法及消毒效果研究[D].太谷：山西农业大学，2015.

[5] Nde C W，Toghrol F，Jang H J，et al. Toxicogenomic response ofMycobacteriumbovisBCG to peracetic acid and a comparative analysis of theM.bovisBCG response to three oxidative disinfectants[J]. Applied Microbiology and Biotechnology，2010，90(1):277-304.

[6] Zanetti F，De L G，Sacchetti R，et al. Disinfection efficiency of peracetic acid (PAA): inactivation of coliphages and bacterial indicators in a municipal wastewater plant[J]. Environmental Technology，2008，28(11):1265-1271.

[7] Bounoure F，Fiquet H，Arnaud P. Comparison of hydrogen peroxide and peracetic acid as isolator sterilization agents in a hospital pharmacy [J].American Journal of Health-System Pharmacy，2006，63(5):451-455.

[8] 王向军. 一种一元制剂过氧乙酸消毒液相关性能研究[J]. 中国消毒学杂志， 2015，32(2):103-105，110.

[9] Gehr R，Wagner M，Veerasubramanian P，et al. Disinfection efficiency of peracetic acid，UV and ozone after enhanced primary treatment of municipal wastewater[J]. Water Res，2003，37(19):4573-4586.

[10] Kitis M. Disinfection of wastewater with peracetic acid: a review[J].Environ Int，2004，30(1):47-55.

[11] 周晓，李鹏，韦键，等. 过氧乙酸对消化内镜消毒效果研究[J].中国消毒学杂志，2013，30(1):11-12.

[12] 陈维，宋金武，邓金花，等 . 一种血液透析机消毒专用过氧乙酸的杀菌效果观察[J].中国消毒学杂志，2014，31(4):336-338.

[13] 杨美玲，张紫虹，胡永成，等. 过氧乙酸复合消毒液的消毒效果及其毒性研究[J]. 中国消毒学杂志,2008,25(2):127-130.

[14] McDonnell G，Russell A D. Antiseptics and disinfectants: activity，action， and resistance[J]. Clinical Microbiology Reviews，1999，12(1):147-179.

[15] Firquet S，Beaujard S，Lobert P E，et al. Survival of enveloped and non-enveloped viruses on inanimate surfaces [J]. Microbes and Environments，2015，4(3):154-159.

[16] 游贤德. 国内过氧乙酸生产与应用[J].化学推进剂与高分子材料,2003,1(4):37-39.

[17] Nadine S，Maria C P，Antonio M，et al. Inactivation kinetics of spores ofBacilluscereusstrains treated by a peracetic acid-based disinfectant at different concentrations and temperatures[J]．Food-borne Pathogens and Disease，2012，9(5):442-451.

[18] 董惠峰，陈成勋. 过氧乙酸在鱼病防治中杀菌效力及对水体pH的影响[J]. 天津农业科学，1995,1(3):32-34.

[19] 王瑶，杨志刚，沈城，等. 中华绒螯蟹EcR基因全长cDNA克隆及表达分析[J].水产学报，2014，38(5): 651-661.

[20] 王万兵，丁凤琴. 河蟹主养池塘套养多品种技术研究[J]. 安徽农业科学，2015，43(16):141-142.

[21] 郑世雄. 池塘养殖中华绒螯蟹细菌性疾病的病原鉴定及流行病学调查[D].合肥：安徽农业大学，2013.

[22] 孙侦龙，朱永祥，陈芸燕，等. 3种水产消毒剂对暗纹东方鲀稚鱼的急性毒性试验[J]. 水产科学，2015，34(5):277-281.

[23] 李西雨，王德忠，潘连德，等. 两种杀虫药物对黄颡鱼鱼苗的急性毒性试验及其临床应用效果[J]. 淡水渔业，2015,45(2):67-71,84.

[24] 徐滨，朱祥云，魏开金，等. 四种稻田农药对克氏原螯虾的急性毒性研究[J]. 淡水渔业，2014,44(5):38-42.

[25] 陈宇炜，高锡云．浮游植物叶绿素a含量测定方法的比较测定[J].湖泊科学，2000，12(2)：185-188.

[26] 国家海洋局.GB/T 12763. 6—2007,海洋调查规范第6部分：海洋生物调查[S]．北京：中国标准出版社，2007.

[27] 谢剑，戴习林，臧维玲，等. 扑草净对两种虾和两种水草的毒性研究[J]. 湖南农业科学，2010(23):147-150.

[28] 施培松，黄峰，杨受保.青虾(Macrobrachiumnipponense)对四种药物敏感性的研究[J].江西农业大学学报，2005，25(3):446-449.

[29] 柏爱旭，任秀芳，张萍，等. “清苔灵”对河蟹、青苔及2种水草的毒性试验[J]. 安徽农业科学，2013,41(9):3944-3945,4067.

[30] 朱磊，陆宏达，余伟楠.蟹寄江氏伪钟虫Pseudovorticellajiangi防治药物的筛选[J]. 广东农业科学，2013(11):119-123.

[31] 余伟楠，陆宏达，朱磊，等. 苯扎溴铵对几种淡水水生动物的急性毒性[J]. 广东农业科学，2014(15):111-115，120.

[32] 沈和定，蒋宏雷. 甲醛对中华绒螯蟹各期溞状幼体及隐藻的急性毒性[J]. 上海水产大学学报，1998，7(1):25-32.

[33] 盛银平，饶毅，华崇新，等. “混养车轮净”对10种常见淡水养殖动物的毒性试验[J].江西水产科技，2013(1):11-12.

[34] 陈刚,谷平华,张冠儒.孔雀绿、福尔马林对罗氏沼虾(M．rosenbergii)各期蚤状幼体的急性毒性研究[J].湛江水产学院学报,1995,15(2):32-36.

[35] 黄志峰，倪国彬，董宣，等.“护草青苔净”对伊乐藻及中华绒螯蟹的毒性试验[J].水产科技情报，2015，42(5):251-254.

[36] 焦少俊，窦艳艳，陈良燕，等. 四环素对苦草 (Vallisnerianatans)生长及细胞超微结构的影响[J]. 环境化学，2008,27(3):335-338.

[37] 王爱卿. 两种有机酸调节水体酸碱度抑制黄丝藻藻华的试验研究[D].上海：上海海洋大学,2014.

[38] 戴灵鹏，张磊，陈露露，等. 铜与乙草胺对浮萍的联合毒性效应[J].农业环境科学学报，2009，28(4):772-776．

[39] 谭伟龙,钱万红,沈建忠.过氧乙酸杀菌剂研究进展[J].医学动物防制,2008,24(9):641-643.

[40] Cho M，Kim J H，Yoon J. Investigating synergism during sequential inactivation ofBacillussubtilisspores with several disinfectants[J]. Water Research，2006，29(11):2911-2920.

[41] 刘吉起,李书建,王竫.过氧乙酸的性质、制备和应用[J].河南预防医学杂志,2004,15(3):171-173.

[42] 廖如燕,林锦炎,陈文胜,等.复方过氧乙酸溶液杀灭微生物效果的实验观察[J].中国消毒学杂志,2001,18(1):6-10.

ToxicityofPeraceticAcidtoJuvenileChineseMittenHandedCrabEriocheirsinensisandAquaticOrganismsinPonds

ZHENG Chuan，PAN Liande

( Key Laboratory of Exploitation and Utilization of Aquatic Genetic Resources，Shanghai Ocean University，Ministry of Education，Shanghai 201306，China )

A static toxicity test was conducted to study toxicity of peracetic acid to Chinese mitten handed crab (Eriocheirsinensis) moulted three times (Ⅲ) and juveniles, oriental river prawn (Macrobrachiumnipponense)，and three species of aquatic plantsElodeanuttallii，CeratophyllumdemersumandVallisnerianatansat water temperature of (20±1) ℃.The results showed that the median lethal concentration (LC50)of Ⅲ stage Chinese mitten handed crab juveniles was 39.36 mg/L at 24 h, 34.36 mg/L at 48 h, 30.55 mg/L at 72 h and 28.05 mg/L at 96 h, with safe concentration (SC)of 7.86 mg/L. The LC50of the Chinese mitten handed crab juveniles was 43.55 mg/L at 24 h, 40.70 mg/L at 48 h, 36.53 mg/L at 72 h and 31.60 mg/L at 96 h, with SC of 10.67 mg/L. The LC50of oriental river prawn was 17.14 mg/L at 24 h, 14.98 mg/L at 48 h,12.02 mg/L at 72 h and 9.50 mg/L at 96 h, with SC of 3.43 mg/L, indicating that the toxic resistance of the aquatic animals in the experiment to peracetic acid was followed as juvenile Chinese mitten handed crab>Ⅲ stage Chinese mitten handed crab juvenile>oriental river prawn. The concentration for 50% of maximal effect(EC50)at 96 h on theE.nuttallii,C.demersumandV.natanswas 20.13 mg/L, 39.78 mg/L and 33.67 mg/L,respectively. Therefore, peracetic acid disinfection should be applied as a dose of less than 3.43 mg/L in a Chinese mitten handed crab culture pond to prevent the harm of peracetic acid.

acute toxicity; peracetic acid; safety concentration

10.16378/j.cnki.1003-1111.2017.04.002

S948

A

1003-1111(2017)04-0403-08

2016-05-24；

2016-09-12.

水产动物遗传育种上海市协同创新中心资助项目(ZF1206).

郑串(1992-)，男，硕士研究生；研究方向：水产动物医学.E-mail:15001885650@163.com. 通讯作者： 潘连德(1960-)，男，教授；研究方向：水产动物健康养殖和医学.E-mail：landp@shou.edu.cn.