聂智毅,黎瑜,康桂娟,蔡海滨,曾日中
巴西橡胶树的克隆及表达分析
聂智毅,黎瑜,康桂娟,蔡海滨,曾日中*
(中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室,海南 儋州 571737)
依据橡胶树胶乳转录组数据,利用RT–PCR技术鉴定了一个快速碱化因子(rapid alkalinization factor, RALF)家族基因cDNA序列。该cDNA长度为767 bp,开放阅读框长度为411 bp,编码136个氨基酸。序列比对显示该RALF基因与有较高相似性,因而命名为。以热研7–33–97无性系橡胶树为材料,采用实时荧光定量PCR对不同组织及乙烯、茉莉酸、伤害、过氧化氢、高盐、低温、干旱等处理下的表达模式进行分析。结果表明:在橡胶树叶片、花、树皮以及胶乳中均有表达,其中胶乳中表达量最高;与健康橡胶树相比,在死皮橡胶树胶乳及树皮中的表达量显著上调;乙烯、茉莉酸、过氧化氢及伤害处理能诱导该基因表达,而低温、干旱及高盐处理则抑制该基因表达,表明可能参与橡胶树的信号传导、产排胶调控以及胁迫响应。
巴西橡胶树;;快速碱化因子;基因克隆;表达分析
巴西橡胶树(Muell. Arg.)是一种重要的热带经济林木,其树皮乳管中的胶乳是天然橡胶的重要商业来源。用乙烯(ethylene, ET)及茉莉酸(jasmonic acid, JA)等植物激素刺激可增加胶乳产量,但其增产机制仍未完全明确[1–2]。目前,乙烯利(2–chlorethylphosphonic acid, ethephon)刺激增产技术已广泛应用于天然橡胶的生产,可有效增加天然橡胶产量,降低割胶强度,在提高劳动生产率的同时,延长橡胶树经济寿命[3]。但是应用乙烯利刺激也会导致橡胶树排胶时间过长、早衰以及死皮(tapping panel dryness, TPD)等负面效应,严重影响了天然橡胶的可持续生产[4]。……