鄂梨2号叶片高效再生体系的建立

涂俊凡+秦仲麒+李先明+伍涛+杨夫臣+朱红艳+刘政+杨立

摘要：以早熟砂梨品种鄂梨2号组培苗叶片为外植体，建立叶片再生体系。结果表明，鄂梨2号叶片再生不定芽最佳培养基为NN69+1.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L IBA，愈伤组织再生率达到100%，不定芽再生率为36.67%；不定芽增殖最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA，增殖系数为2.19；不定芽在1 000 mg/L ABT中浸蘸5 s后接种在添加500 mg/L活性炭的1/2MS培养基上，生根率最高，为66.67%；试管苗移栽成活率为84.44%。

关键词：砂梨；鄂梨2号；组培苗叶片；再生

中图分类号：S661.2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）23-4613-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.23.049

Abstract： Leaves excised from Eli 2 Hao were used as explants to establish regeneration system. The results indicated that the maximum adventitious buds regeneration frequency achieved 36.67% on the mediu of NN69+1.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L IBA. The most suitable medium for shoot multiplication was MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA and the average multiplication coefficient was 2.19. The buds were dipped in 1 000 mg/L ABT for 5 s and inoculated on 1/2MS medium with 500 mg/L activated carbon. The highest rooting rate was 66.67%， and the survival rate of plantlets was 84.44%.

Key words： sand pear； Eli 2 Hao； leaf； regeneration

鄂梨2号是湖北省农业科学院果树茶叶研究所选育的优质早熟砂梨新品种，果实7月中下旬成熟。果皮黄绿色，果实倒卵圆形，平均单果质量200 g，含可溶性固形物12.0%～14.7%，总酸0.14%～0.16%[1]。本研究以早熟砂梨品种鄂梨2号试管苗叶片为试材，进行不定芽诱导与增殖以及生根等培养基的筛选，建立叶片高效再生体系，为鄂梨2号梨的规模化繁殖、遗传转化改良及无性系变异筛选奠定了基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验材料为早熟砂梨品种鄂梨2号[Pyrus pyrifolia Nakai.cv.Eli 2 No.2]，组培苗来自湖北省农业科学院果树茶叶研究所实验室，叶龄30 d左右，外植体为长势良好的叶片。

1.2 叶片不定芽诱导

取继代培养4～5周、长势较为一致的试管苗上部叶片，在无菌条件下，将叶片切割成大小为0.5～1.0 cm×0.5～1.0 cm的叶盘，每个处理接种20个外植体，重复3次，接种在附加TDZ和IBA的NN69、MS培养基上，30 g/L蔗糖、6.5 g/L琼脂、pH 5.8。暗培养3周后转至光下培养。培养温度（25±2） ℃，光照1 500 lx，光周期16 h/d。接种后60 d统计数据。不定芽诱导率=萌芽外植体数/接种外植体数×100%。

1.3 不定芽的增殖

将叶片上诱导的不定芽接种在不同处理的MS增殖培养基上。……