高效液相色谱法同时测定果蔬汁饮料中20种禁限用食品添加剂

孙雅君

【摘 要】通过高效液相色谱法，对果蔬汁饮料中20种禁限用食品添加剂进行了同时测定，结果表明，20种食品添加剂在0.5～50.0μg/mL质量浓度范围内相关系数>0.9990，线性关系良好，方法检出限范围0.5～12.5mg/kg，定量限范围2.5～40.0mg/kg，平均加標回收率范围80.1%～100.09%，相对标准偏差1.5%～4.9%。该方法检测添加剂种类多、操作简单、回收率和精密度均满足要求，适用于果蔬汁饮料中多种添加剂的同时检测。

【关键词】高效液相色谱法；果蔬汁饮料；食品添加剂

在现代食品工业中，食品添加剂是其重要组成部分，但是在食品加工环节中，违规及超限量使用食品添加剂，会严重威胁人体健康，因此，食品安全监管已被列入政府食品安全工作的重要内容。目前，食品添加剂的检测方法主要有气相色谱法、薄层色谱法、衍生光谱法、液相色谱法、毛细管电泳法以及色谱-质谱联用方法等，但能同时测定10种以上食品添加剂的方法较少，大多数方法只能同时测定几种食品添加剂。因此，需要建立准确度高、高通量测定果蔬汁饮料中食品添加剂的方法。

一、实验部分

1.1实验材料与仪器

实验材料包括：20种食品添加剂标准物质，包括山梨酸、日落黄、安赛蜜、阿斯巴甜、苯甲酸、柠檬黄、糖精钠、新红、苋菜红、诱惑红、赤藓红、胭脂红、亮兰、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丁酯、碱性橙Ⅱ，碱性橙21，碱性橙22；甲醇、乙腈、乙酸、氨水和乙酸铵（分析纯）；纯水以及PVDF滤膜（0.45μm，13mm）。

主要仪器：Agilent1260型高效液相色谱仪，配备二极管阵列检测器；PL403-IC型电子天平；3-18K型高速离心机；Milli-Q型纯水系统。

1.2液相色谱条件

色谱柱：AgilentZORBAXSB-C18色谱柱（150mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇（A），20mmol/L乙酸铵溶液（B），流动相梯度洗脱程序见表1；流速1.0mL/min；柱温30℃；进样量10μL。

1.3标准溶液制备

用体积比1：9的甲醇和水，将各种添加剂标准物质配制成浓度均为50μg/mL的混合标准储备液，可在4℃条件下保存1个月；将混合标准储备液用甲醇和水（体积比1：9）依次稀释成系列标准溶液，浓度分别为0.5μg/mL，1.0μg/mL，5.0μg/mL，10.0μg/mL，20.0μg/mL，50.0μg/mL，因该溶液久置易浑浊，应于使用前配制。

二、结果与讨论

2.1方法检出限及线性相关测定

用高效液相色谱法测定制备好的0.5～50.0μg/mL标准工作液采用外标法定量。以峰面积为纵坐标、各组分浓度为横坐标绘制工作曲线，以3倍信噪比确定方法检出限（LOD），10倍信噪比确定方法定量限（LOQ）。由结果可知，20种添加剂在0.5～50.0μg/mL范围内线性关系良好，相关系数大于0.9990，方法检出限范围0.5～12.5mg/kg，定量限范围2.5～40.0mg/kg。

2.2回收率与精密度试验

按照前述试验方法及条件对不含有待测组分的果蔬汁饮料样品进行加标回收率和精密度试验。加标浓度分别选择定量限、2倍定量限、10倍定量限三个水平，每个水平取6份样品进行试验，计算平均回收率和相对标准偏差（RSD）。由结果可知，20种添加剂的平均加标回收率范围80.1%～100.09%，相对标准偏差1.5%～4.9%。

2.3实际样品测定

采用本方法对16种果蔬汁饮料进行检测，检测结果显示，在16个样品中检出13种食品添加剂，其中在15个样品中检出防腐剂（苯甲酸或山梨酸）；14个样品中检出甜味剂（安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜）；13个样品中检出食品色素；所有样品中均未检出对羟基苯甲酸酯类防腐剂。结果表明，该方法测定准确、灵敏度高，适用于果蔬汁饮料中多种添加剂的同时检测。

三、结束语

上文通过建立一种高效液相色谱技术同时检测果蔬汁饮料中20种食品添加剂的方法，通过实验验证，该方法回收和稳定性良好，能够实现在单一液相分离条件下对20种食品添加剂的同时测定，方法快速、准确、灵敏度高，对监测食品中添加剂的使用情况具有重要的意义。

【参考文献】

[1]刘胜男，张国庆，王素方，等.高效液相色谱法同时测定果蔬汁饮料中20种禁限用食品添加剂[J].轻工学报，2016，31（4）：23-29.

[2]牟霄，张璐，张崇淼，等.超高效液相色谱法同时测定饮料中14种食品添加剂[J].食品安全质量检测学报，2017，8（8）：3177-3184.