青蒿琥酯通过增加活性氧簇生成诱导人肝癌HepG2细胞凋亡*

朱文赫， 张 巍， 李 妍， 徐俊杰， 张 红， 吕士杰

(吉林医药学院生物化学教研室， 吉林 吉林 132013)

1971年中国科学家从中药黄花蒿中提取出了青蒿素，证实青蒿素是一个具有过氧基团的新倍半萜内酯化合物。青蒿琥酯(artesunate，ART)是半合成的青蒿素衍生物，具有水溶性好、安全性高和耐药性低的突出优点，有很好的抗疟效果，同时其表现出的强大抗肿瘤活性越来越引起国内外学者注意[1-2]。Zhao等[3]通过体外培养A549细胞，并构建裸鼠体内移植瘤模型发现青蒿琥酯能增强A549细胞的放射敏感性，青蒿琥酯联合放疗可抑制移植瘤的生长。研究发现[4]，青蒿琥酯能够抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖并诱导其凋亡，并通过抑制骨髓血管新生和逆转骨髓瘤细胞多药耐药等多种机制，抑制多发性骨髓瘤的发生和发展。虽然青蒿琥酯对于不同组织来源的肿瘤细胞具有一定的杀伤性，但具体机制尚未完全明确。

因此，本研究以人肝癌细胞HepG2为研究对象，探讨青蒿琥酯促人肝癌细胞HepG2的凋亡作用及其可能的分子机制，为青蒿琥酯在肝癌临床治疗中应用提供理论依据。

材 料 和 方 法

1 细胞、试剂与仪器

人肝癌HepG2细胞购自中科院上海生命科学研究院细胞资源中心，由吉林医药学院生物化学教研室保存。细胞培养于含10%小牛血清、1×105U/L青霉素和100 mg/L 链霉素的RPMI-1640培养液中，置于37 ℃、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中培养。每2天更换培养液1次，待细胞长满至培养瓶底，以0.25%胰酶消化传代。

青蒿琥酯购于Sigma；抗Bax、Bcl-2、caspase-3和细胞色素C(cytochrome C，Cyt C)抗体购于Santa Cruz；……