清肺解毒胶囊的质量标准研究

邹昱蕾 张韶湘 余晓玲

摘要：目的 建立清肺解毒胶囊的质量标准。方法 采用薄层层析法对其所含冰片及人工牛黄中的胆酸进行了定性鉴别，应用气相色谱法对冰片中龙脑进行了含量测定。结果 其线性方程为Y=3.5701x-5.8900×10-3，r=0.9999；平均回收率为101.03%，RSD=0.82%（nd=9）；精密度试验的RSD=0.23%（n=5）。结论 所建立的质量检测方法简便、准确，可作为清肺解毒胶囊的质量控制方法。

关键词：清肺解毒胶囊；薄层层析法；定性鉴别；气相色谱法；含量测定；质量控制

中图分类号：R927.2 文献标志码：A 文章编号：1007-2349（2018）11-0072-02

清肺解毒胶囊为曲焕章先生的遗方，由人工牛黄、冰片、拔毒散、灵丹草等组成，具有清热解毒、清肺润燥、凉血消肿的功效，主要用于风热感冒，瘟病发热、咽喉肿痛，扁桃腺炎，肺热咳嗽。为了控制该制剂的质量，保证药物的疗效，我们对该药进行了质量标准的研究。

1 仪器、样品及试药

仪器为HP6890气相色谱仪，HPChemstations工作站，fID检测器，AE240电子天平，龙脑（中国药品生物制品检定所提供 批号10881-200202 供含量测定用）、水为超纯水，其余溶剂为分析纯。硅胶G薄层板（青岛海洋化工厂），胆酸对照品（中国药品生物制品检定所提供）。

2 方法与结果

2.1 薄层层析鉴别 （1）取本品内容物0.5 g，加甲醇20 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 mL溶解，作为供试溶液.另取胆酸对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作照品溶液.照薄层色谱法（《中国药典》一部附录VI B）试验，吸取上述两种溶液各1 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙醚-氯仿-冰醋酸（2：1：1）为展开剂，展开，取出，凉干.喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。（2）取本品内容物0.5 g，加石油醚（30℃～60℃）20 mL超声提取，分取石油醚液，挥至约1 mL，作为供试品溶液。另取冰片对照品，加石油醚（30℃～60℃）制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷—醋酸乙酯（17：3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

2.2 含量测定

2.2.1 色谱条件选择 色谱柱：HP-INNOWAX 30 m×0.53 m，1.0μm film；进样口温度：230℃；柱温：140℃。检测器温度：230℃；载气（N2）：5 mL/min；氢气：30 mL/min；空气：350 mL/min；Make up（N2）：25 mL/min；定量法：内标法 内标物：水杨酸乙酯 在此条件下测定样品峰形良好，缺冰片阴性样品对测定无干扰，理论板数按龙脑峰计为19086，故理论板数按龙脑峰计应不低于10000。

2.2.2 供试品溶液的制备条件选择 取本品研细，混匀，取约1 g（平行3份），精密称定，置25 mL量瓶中，精密加入醋酸乙酯15 mL，精密加入内标溶液（2 mg/mL水杨酸甲酯醋酸乙酯液）5 mL，用醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液，同法测定，结果见表1，表明可直接溶解。

2.2.3 方法学考察

2.2.3.1 线性关系考察 称取龙脑对照品0.05030 g置25 mL量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀释至刻度。精密吸取对照品溶液1、2、3、4、5 mL于10 mL量瓶中，精密加入内标溶液（2 mg/mL水杨酸甲酯醋酸乙酯液）各5 mL，用醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，精密量取对照品溶液各1 μL分别进行色谱测定，按上述条件测定峰面积，结果见表2。

由表可得，龙脑进样量在0.2ug～1ug范围内与对照品峰面积及内标峰面积之比呈良好的线性关系，回归方程Y=-5.8900×10-3+3.5701X；r=0.9999（X为龙脑进样量，Y为A对/A内）。

2.2.3.2 精密度试验 精密吸取供试品溶液1 μL，按上述色谱条件连续进样5次，测定峰面积，其 A对/A内值分别为1.2854、1.2855、1.2861、1.2805、1.2885，平均值为1.2852，RSD=0.23 %。

2.2.3.3 稳定性试验 分别精密吸取对照品溶液（龙脑对照品10 mg，精密称定，置25 mL量瓶中，精密加入内标溶液5 mL，加醋酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀）及供试品各1 μL与0、1、2、4、8 h注入色谱仪，按上述色谱条件进行分析测定峰面积，结果见表3。

结果对照品及及供试品表明在8小时内测定稳定。

2.2.3.4 重现性试验 取批号为20101025的清肺解毒胶囊，按含量测定方法重复进行5次试验，结果见表4，证明此方法重现性良好。

2.2.3.5 回收率试验 精密取重现性试验的同一批号（20101025）的清肺解毒胶囊（含量0.965%），9份，分别精密加入不同量的龙脑对照品溶液，按上述含量测定方法测定，结果见表5。

2.2.3.6 样品含量测定 分别取3个批号的清肺解毒胶囊按上述方法进行含量测定，结果见表6。

根据上述测定结果，暂定本品每粒（0.4 g/粒，即每粒含龙脑3.84 g），考虑到大生产及药材间的差异，下浮20%计，暂订本品每粒含龙脑不得低于3.0 mg。

3 讨论及结果

清肺解毒胶囊为曲焕章先生的遗方，由人工牛黄、冰片、拔毒散、灵丹草等组成，考虑其成分复杂，采用薄层层析法对其所含人工牛黄中的胆酸、冰片进行了定性鉴别，应用气相色谱法对冰片中龙脑进行了含量测定。

按照一般中药对其所测定物质的量不少于80%计，将本品龙脑含量限度规定为以干燥品计，每粒龙脑含量应不低于3.0 mg。

其余质量检查方法应符合《中国药典》四部附录胶囊项下的所有規定。

建立的含量测定方法简便、准确，可作为清肺解毒胶囊的质量控制方法。

参考文献：

[1]杨洪武，王峥，辛敏通，等.薄层扫描法测定人工牛黄及其制剂中胆酸的含量[J].中成药，2003（4）.

[2]王伟毅，夏晶，季申.牛黄抱龙片中人工牛黄含量测定方法的研究[J].中成药，2010（3）.

[3]张淼，袁浩，周亚楠，等.GC法测定特灵眼药水中冰片的含量[J].中国药事，2009（11）.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京：中国医药科技出版社，2015.

（收稿日期：2018-07-24）