基于Image J软件的肌原纤维蛋白SDS—PAGE优化

朱萌+石柳+汪兰+熊光权+吴文锦+李新+丁安子

摘要：采用浓缩胶浓度为5%，分离胶浓度为12%的SDS-PAGE凝胶系统，运用Image J软件分析不同蛋白质浓度、pH、NaCl浓度对肌原纤维蛋白的分离效果。结果表明，在蛋白质浓度为1.2 mg/mL、pH为7.5、NaCl浓度为0.5 mol/L时，肌原纤维蛋白中各蛋白质及其亚基实现较好分离，均匀分布于整个电泳条带，且各蛋白条带光密度值能清晰分辨。Image J软件能有效地应用于SDS-PAGE图像分析。

关键词：肌原纤维蛋白；SDS-PAGE；Image J软件

中图分类号：TS254.1 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）24-4839-05

Image J软件是由National Institutes of Health开发的基于Java的图像处理软件，可计算选定区域内分析对象的一系列几何特征。现已广泛应用于植物叶片形态特征描述[1]、金属显微定量分析[2]、针织物孔隙率统计[3]、淀粉表面几何特征分析[4]等场景。目前，Image J软件在电泳图像分析中也有应用，可将蛋白条带数据进行量化，转化为光密度值，解决了肉眼观察的不确定性问题[5]。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）作为一种快速、经济、可重复的蛋白质定性、定量分析及特征鉴定的方法，已广泛应用于各种畜禽肉[6]、水产品[7]、水稻[8]、大豆[9]等农产品蛋白质的分析检测。采用条件适宜的缓冲溶液稀释提取的样品蛋白，并制备电泳样品，利用SDS-PAGE中网状结构聚丙烯酰胺凝胶所具有的分子筛效应，将不同分子量的蛋白质及其亚基进行分离，从而达到分辨蛋白质的目的。但对于一些极端条件下的样品蛋白，如高NaCl浓度的酱油发酵液、蛋白酶解液等，不能直接运用SDS-PAGE手段进行分析检测。因此，本……