邹飏 ,李浩 ,尚江荫子 ,双 峰 ,魏志远 ,单记春
青 藤 碱 (9α,13α,14α -7,8-Didehydro-4-hydroxy-3,7-dimethoxy-17-methylmorphinan-6-one,Sinomenine)是从传统中药青风藤(Caulis sinomenii)中提取的一种生物活性成分,具有抗炎、镇痛、免疫抑制、降压、抗心律失常等多种生物活性[1]。临床已有使用的青藤碱类药物有正清风痛宁片、盐酸青藤碱注射液、毛青藤总碱片等制剂,主要用于治疗类风湿性关节炎、强制性脊柱炎、系统性红斑狼疮等疾病[2],近年来也有此类药物用于治疗慢性肾炎、抗氧化、抗肿瘤的文献报道[3-7]。
骨保护素(OPG)又称为破骨细胞抑制因子,是肿瘤坏死因子受体超家族中的一员,是目前发现的唯一能直接下调破骨细胞功能的因子。RANKL(细胞核因子受体活化因子配体)是肿瘤坏死因子超家族中的一员,其主要由成骨细胞和骨基质分泌,RANKL能与破骨细胞表面的RANK(细胞核因子受体活化因子)结合,从而刺激破骨细胞分化和成熟、启动破骨细胞的骨质吸收作用,同时抑制破骨细胞凋亡[8,9]。体外方面,青藤碱抑制RANKL诱导的0Cs骨吸收活性并降低相关破骨方面的指标。体内实验显示青藤碱抑制RANKL诱导的NF-κB信号通路,同时促进RANKL诱导的成熟OCs凋亡[10]。但青藤碱对成骨细胞相关的研究并未见报道,就此我们展开青藤碱对成骨细胞方面的研究。
1.1 材料与试剂 小鼠成骨细胞系MC3T3E1细胞株(购于中国科学院上海生命科学研究院),胎牛血清(FBS)(公司),DMED 培养液(Hyclone 公司),抗坏血酸 (sigma公司),β-甘油酸磷酸钠 (sigma公司),地塞米松(sigma 公司),青霉素/链霉素(sigma公司),DMSO(sigma公司)盐酸青藤碱(大连美仑生物技术有限公司……