章诺贝,陈 新
(南昌大学第二附属医院:1.消化内科;2.核医学科,南昌 330006)
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是威胁人类健康的主要恶性肿瘤之一,是全球第五大常见的恶性肿瘤,在我国,HCC的病死率更是高居恶性肿瘤病死率的第2位[1]。HCC的发生、发展是多因素、多阶段、多基因相互作用的结果,包括病毒感染、致癌物的作用、癌基因激活和抑癌基因失活、细胞凋亡和增殖调节失控等。尽管人们对HCC已经进行了大量的研究,但关于HCC发生、发展的确切机制仍有待进一步阐明。GTP连接蛋白(guanosine 5′-triphosphate-binding proteins,GTPBP)是指能与鸟嘌呤核苷酸结合,具有GTP水解酶活性的一类信号转导蛋白,由α、β、γ 3个不同亚基组成,其在细胞信号传递转导、细胞骨架形成、蛋白质合成等细胞的多种生命活动中均发挥重要作用[2]。GTPBP4是GTPBP家族成员之一,其编码基因是一广泛存在于从酵母到人类各种真核生物中的高度保守基因[3]。近来有研究报道,GTPBP4表达减弱可使人结肠癌细胞的增殖受到抑制,而GTPBP4的表达升高又与结肠癌和乳腺癌患者生存率下降有关[4-5]。但关于GTPBP4在HCC发生、发展中作用及其机制的研究仍鲜有报道。
1.1 材料
1.1.1 临床标本 75例HCC患者的肝癌组织芯片购自上海芯超生物科技有限公司,人肝癌组织芯片编号:HLiv-HCC150CS-02。其中,男63例,女12例;年龄34~77岁,平均52.10岁。
1.1.2 人肝癌细胞株 人HCC细胞株SMMC-7721、HEPG2、HUH-7、HEP3B均购自上海吉凯公司。
1.1.3 实验动物 BALB/cA 裸小鼠,4周龄,购自上海斯泰克实验动物有限公司[动物合格证号SCXK(沪)2012-0002],寄养于上海同济大学实验动物中心。
1.1.4 主要试剂 10%胎牛血清(FBS)、DMEM购自美国Gibco公司,脂质……