新疆棉花根际细菌TaqMan探针实时荧光定量PCR的建立及时空动态分析

张 涛，李雪艳，杨红梅，楚 敏，高 雁，曾 军，霍向东，张 涛，林 青，欧提库尔，李玉国，娄 恺，史应武

(1.新疆大学生命科学与技术学院，乌鲁木齐 830052；2.新疆农业科学院微生物应用研究所，乌鲁木齐 830091)

0 引 言

【研究意义】棉花黄萎病是一种土传病害，是新疆棉花生产上最主要的病害之一，严重阻碍着新疆棉花产业的发展[1]。棉花黄萎病菌在土壤中生长繁殖，产生大量微菌核，改变棉花根际微生态环境。因此，分析棉花根际微生物动态对于研究棉花根际微生物与黄萎病的发生具有重要意义。【前人研究动态】顾美英等[2-3]研究发现，新疆棉花黄萎病发病株根际土壤微生物总量均大于健康株根际微生物总量。李洪连等[4-6]研究表明，棉花对黄萎病的抗性除了与根际微生物数量有密切关系外，与根际微生物种类、种数和优势种也有关。张燕[7]研究表明，病株棉花的根际土壤中细菌群落结构是动态的并随着棉花的生长而发生规律性的变化。前人研究已经证实，棉花黄萎病的发生与根际微生物有密切关系。【本研究切入点】棉花根际微生物通过改变棉花根际微生态影响棉花黄萎病的发生，而细菌在根际微生物群落中数量和种类最多[8]。因此，定量检测棉花根际细菌是研究棉花根际微生物与宿主黄萎病发生相关性的基础。目前，棉花根际微生物定量检测方法主要有选择性培养基法、活体检测法、免疫检测法和分子生物学法。近年来，实时荧光定量PCR技术以其快速、灵敏、准确、特异性强和重复性好等优点，已成为棉花根际微生物检测的重要工具[9-13]。……