ARMS法检测肺腺癌EGFR基因突变及临床意义

李晓锋，刘　希，张冠军，汪园园

(西安交通大学第一附属医院病理科，西安　710061)

肺癌是最常见致命的恶性肿瘤，严重威胁人类健康和生命。研究显示，仅2015年，我国就大约有429万新发恶性肿瘤病例和281万死亡病例，肺癌的发病率和死亡率位于各种肿瘤类型之首[1]。肺癌按组织学分型可分为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和小细胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)。其中，NSCLC占原发性肺癌的80%左右。近年来肺腺癌的发病率不断上升，成为最常见的原发性肺恶性肿瘤。尽管肺癌的诊断、治疗已日趋规范，但目前尚缺乏有效的早期筛查的方法，很多患者在就诊时已经为晚期，难以根治，5年生存率仅16%[2]。自2004年表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)基因的作用机制被发现后，针对这一靶点的个体化治疗使NSCLC的预后发生了戏剧性的改变。研究发现，NSCLC体细胞EGFR基因突变状况与NSCLC患者分子靶向治疗获益情况有关，突变的患者对酪氨酸蛋白激酶小分子抑制剂(tyrosine kinase inhibitor，TKI)特别敏感，而EGFR基因野生型的患者几乎不能获益，针对EGFR-TKIs在NSCLC治疗中的出现，其针对特定人群疗效高、副作用小，给这部分患者的生存带来希望。可见对EGFR基因进行突变检测以选择合适的患者进行靶向治疗十分必要[3～5]。课题组所用的扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutation system，ARMS)法，在实时荧光定量PCR的基础上，利用特异性的引物对DNA靶向序列进行准确的PCR扩增，然后利用荧光标记探针对PCR扩增产物进行检测。本实验采用ARMS法对本院确诊的肺腺癌患者标本EGFR基因突变进行检测研究。

1　材料和方法

1.1研究对象收集2015年1月～2016年8月西安交通大学第一附属医院病理科有住院病历的肺腺癌患者标本，共566例，其中女性254例，男性312例，年龄28～91岁，中位年龄61岁；……