阳荷总黄酮对食用油脂的抗氧化作用研究

张海涛，马明兰 ，全 青，刘 阳，罗立新

(1.武汉大学 化学与分子科学学院，湖北 武汉 430071；2.武昌理工学院 生命科学学院，湖北 武汉 430223)

食用油尤其植物油很大一部分是不饱和脂肪酸,本身对人体是无害,但是这种不饱和脂肪酸有自由氧化的特性,在光照,受热及密封不严情况下与空气接触就会被氧化,长期食用氧化酸败的油脂会对肝脏产生负担,影响生长发育[1]。为了抑制油脂的氧化，需要添加抗氧化剂，寻找有效的天然的抗氧化剂意义重大[2]。

1 实验

1.1 材料、试剂与仪器

阳荷：2016年8月采于恩施建始县。

芦丁标准品(中国药品生物制品检定所)；95%乙醇；冰乙酸；亚硝酸钠；硝酸铝；氢氧化钠；碘化钾；异辛烷；硫代硫酸钠；抗坏血酸；柠檬酸；大豆油。

T224S型电子分析天平(赛多利斯仪器公司)；UV-1800紫外-可见分光光度计(日本岛津)；索氏提取器；超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技股份有限公司)；DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器(巩义市予华仪器有限责任公司)；小型粉碎机；RE-201C旋转蒸发仪(巩义市予华仪器有限责任公司)；2.5T 冷冻干燥机(Labconco)；恒温培养箱等。

1.2 方法

1.2.1 阳荷黄酮的提取

阳荷洗净→烘干(35℃)→粉碎→称量→超声辅助醇提→冷却→离心→旋转浓缩→醇沉→冷冻干燥→得黄酮粗提物[3]。

1.2.2 阳荷黄酮含量的测定

1.2.2.1 标准曲线的绘制

精密称取干燥至恒重的芦丁标准品10.0mg置100mL容量瓶中，用少量95%乙醇溶解后，加50%乙醇定容至刻度，摇匀，即可得0.1mg/mL的芦丁标准溶液。

精密吸取上述芦丁标准溶液0.0,1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL分别置于25mL 容量瓶中，加入50%的乙醇5mL，加入5%的亚硝酸钠0.3mL，摇匀，放置6min，加10%的硝酸铝0.3mL摇匀，放置6min，加入1%的氢氧化钠4mL摇匀，最后用50%的乙醇稀释至刻度，放置15min[4]，即得浓度为0.000mg/mL、0.004mg/mL、0.008mg/mL、0.012 mg/mL、0.016 mg/mL、0.020 mg/mL的标准品溶液，以试剂空白作参比，在200至550nm波长范围扫描，以最大吸收峰作为测试波长。以吸光度A 为纵坐标，浓度c为横坐标，绘制标准曲线。用最小二乘法进行线性拟合,得c与A 的线性回归方程以及相关系数R2。

1.2.2.2 阳荷黄酮含量的测定

精密取黄酮粗提物10.40mg于50mL的容量瓶中，加95%乙醇适量使之溶解，加50%乙醇稀释至刻度，即得浓度为0.208mg/mL的黄酮样品溶液。取样品溶液1mL，按上述标准曲线方法进行测定，并由标准曲线或回归方程计算样品含量。

1.2.3 阳荷黄酮对食用油的抗氧化实验

1.2.3.1 抗氧化实验

采用Schaal烘箱法，称取定量的油样，加入不同抗氧化剂，敞口置于65±1℃的恒温箱中，每隔48h搅拌一次并测POV值。POV值越低，表明所添加物质的抗氧化作用越强。通过POV值的变化趋势确定抗氧化剂的抗氧化性能。

POV值得测定方法：按照GB/T 5538-2005规定的方法测过氧化值。

抗氧化能力的评价方法:POV值与时间关系曲线来衡量黄酮对油脂的抗氧化能力。

2 结果

2.1 样品溶液吸光值为

代入标准曲线方程：y=12.65x+0.4279, R2=0.9996。测定阳荷黄酮粗粉中总黄酮含量为42.2%。

C/(mg/mL)0.0040.0080.0120.0160.02A0.4800.5280.5770.6310.681

2.2 不同添加量阳荷黄酮对大豆油的抗氧化作用

按照GB2760-2011，植物油脂中天然抗氧化的添加量一般为0.02%～0.07%，故本实验阳荷黄酮的添加量选为0.05%，0.1%，0.2%。

表1 不同添加量的阳荷黄酮对大豆油的抗氧化作用

由表1可以得出，阳荷黄酮加入后大豆油的POV值明显低于不加抗氧化剂的，说明阳荷黄酮具有的抗氧化能力，且抗氧化能力随添加量的增加而变强。

2.3 阳荷黄酮与常见的抗氧化剂在大豆油中抗氧化作用比较

表2 不同抗氧化剂对大豆油的抗氧化作用比较

由表2得出，加入阳荷黄酮后的大豆油的POV值与加入维生素C组过氧化值接近，但明显低于柠檬酸组，说明其氧化能力与维生素C相当，但强于柠檬酸。

3 结论

阳荷总黄酮对油脂表现出较强的抗氧化能力，且抗氧化能力强于柠檬酸，相当于维生素C,抗氧化能力随添加量的增大而变强。阳荷黄酮本身还具有一定的药效，可以作为一种天然抗氧化剂用于油脂及其含油食品中，以延长保质期。

[1] 陈 媛，周 玫，刘尚善，等.营养、衰老与自由基理论[J].营养学报，2005,27(3)：178-180.

[2] 徐雅琴，于泽源，任华峰，等.红树莓叶片中黄酮类物质的提取及抗氧化作用研究[J].中国油脂,2003,28(5):69-71.

[3] 张 蕾，乔旭光，占习娟，等.超微粉粹对荷叶黄酮类物质提取工艺的影响[J].食品与发酵工业，2006,32(11):142-145.

[4] 范 照，张迪清.保健食品化学及其检测技术[M].北京：中国轻业出版社，1998(6)：52-57.

[5] 杨琼琼，刘雄民，赖 芳，等.柿木皮单宁的超声醇提工艺木皮单宁的超声醇提工艺木皮单宁的超声醇提工艺优化及抗油脂氧化研究[J].精细化工，2015(11)：1236-1242.