乳胶-四氧化三铅灌注山羊动脉效果初探*

孙建永 伏 辉

(长沙医学院形态学实验室,长沙 410219)

四氧化三铅是解剖学技术中用于血管灌注造影最常用的造影剂之一。郝丽文[1]、漆光平[2]、楼新法[3]、唐茂林[4]等已经对材料、技术、方法等方面进行了较为深入的探究。郝丽文等[1]指出应用乳胶-四氧化三铅悬浊液用于大动物造影研究还有待探讨。查阅国内文献未见应用血管造影剂乳胶-四氧化三铅悬浊液进行羊动脉灌注的方法和影像学效果的相关报道。为此,笔者使用乳胶-四氧化三铅悬浊液对山羊动脉灌注的方法和影像学效果进行了探究。

1 材料和方法

1.1 器材

天平、500ml量杯、细滤网、玻璃棒、20ml注射器、止血钳、手术刀、剪刀、7号外科手术线、玻璃插管、带阀门的导管、橡胶管、数码相机等。

1.2 使用药品及准备

1000ml生理盐水、5ml肝素、红色乳胶2L、四氧化三铅(Pb3O4,衡阳市凯信化工试剂有限公司,橙红色粉末状) 500 g、氨水500 ml。将灌注所需的玻璃插管和注射器等物品用氨水浸泡,以防止使用时乳胶液凝固[2]。血管冲洗液的准备,1000ml生理盐水中加入5ml肝素,充分混匀。

1.3 灌注液的配置

填充剂采用市场直接购得的红色乳胶,经细滤网3次过滤后,用500ml量杯量取1000ml过滤后乳胶。用托盘天平称取1000g Pb3O4,缓慢加入乳胶中,用玻璃棒充分搅拌均匀,制成灌注所需的乳胶-四氧化三铅悬浊液。

1.4 山羊准备

成年黑山羊3只,雌雄不拘,宰杀,切开颈总动脉放血,观察动脉无血液流出之后,沿腹前壁正中纵行切开腹壁,将肠管等腹腔内容物用手掏出,显露肾以下腹主动脉,同时钝性分离肠系膜下动脉和直肠上部并结扎。剪断肠系膜上动脉和直肠上部结扎处以上的部分。于第1～2或第2～3腰椎椎间隙处截断山羊腰部,同时将腹主动脉和下腔静脉一并离断。留取山羊腹主动脉下段及后肢血管行动脉灌注。

1.5 插管

玻璃插管一端插入腹主动脉,一端与橡胶管连接。分离腹主动脉,用7号外科手术线将插管固定在腹主动脉上。将含有5ml 肝素的1000ml生理盐水悬吊于1.5m高度处,用带有阀门的导管将生理盐水通过玻璃导管的橡胶端与山羊连接。打开阀门,释放生理盐水冲洗动脉,同时按摩山羊的大腿部肌肉,观察其下腔静脉断端处流出液体颜色。待流出的液体颜色由红色变为清澈时,关闭导管阀门,冲洗完毕。将导管与玻璃插管的橡胶端分离,悬吊羊腿,使血管内的液体完全流出。

1.6 乳胶-四氧化三铅悬浊液灌注方法

充分混匀制备好的乳胶-四氧化三铅悬浊液,过滤至500ml烧杯中。将羊腿平放,取20ml去针头空注射器,抽取10ml氨水现行注入山羊动脉,再将其活塞推至注射器前端,连接玻璃插管橡胶后,抽出管内的部分气体,形成负压,助手持止血钳夹闭玻璃插管的橡胶头处,然后拔出注射器,并抽取20ml乳胶-四氧化三铅悬浊液,随即接入玻璃插管橡胶端,同时助手放开止血钳,缓慢推入乳胶-四氧化三铅悬浊液,直至玻璃插管的橡胶端由于压力变为球状。此时可见腹主动脉及左右髂血管已经完全充盈。助手持止血钳夹闭玻璃插管的橡胶端,在紧贴夹闭处止血钳的上下端分别用7号外科手术线结扎,放开止血钳。

灌注量视个体差异而定,双侧羊腿注射乳胶-四氧化三铅悬浊液灌注量为30～50ml。

灌注完成后静置10～15min,观察有无漏液现象。随即将标本置于充满冰块的储物箱内,运往医院影像科进行X线、CT血管拍摄并重建血管。冷藏保存2～3d待乳胶-四氧化三铅悬浊液凝固化后,再行解剖山羊观察血管灌注情况。

2 结果

造影剂乳胶-四氧化三铅悬浊液显影明显,X线摄片(图1)及CT(图2)可清晰观察山羊髂血管及股动脉分支分布。解剖可肉眼观察到穿支血管及其细小分支(图3)。

图1 X线图像. 图2 CT重建图像. 图3 山羊后肢标本解剖效果.

3 讨论

3.1 乳胶-四氧化三铅悬浊液灌注试剂的选择

3.1.1 乳胶的使用特点 (1) 使用方便,不易沉降,有利于标本的灌注;(2) 乳胶对温度要求不高,常温下即可制备乳胶-四氧化三铅悬浊液,同时也降低了铅中毒的风险。由于不需要特殊设备,操作过程简单,用时较短;(3) 灌注速度可操控,2～3d即可固化,解剖时观察血管不易断裂。缺点是由于乳胶颗粒大的特性,灌注前需摇匀,需要进行3次过滤,方能获得较为满意的溶剂;灌注液摇匀后放置时间不可太久,最好在1～2min 内实行灌注。

3.1.2 明胶与四氧化三铅的配方 楼新法等[3]于2006年实验得出明胶与四氧化三铅的最佳配方为300 Bloom的明胶5g,40℃ 蒸馏水100ml,四氧化三铅100g,灌注量为20～30ml/kg。但是明胶属热填充剂,操作不易控制。本次实验使用乳胶和四氧化三铅的比例为100ml：100g,经腹主动脉至0.2mm之间的血管显影效果满意。

3.2 注意事项

实验场所的选取要求远离食品生产销售场所,需在实验室进行,减少环境污染。通风良好,环境空旷,实验操作中注意操作人员的个人安全防护,采取实验材料及时回收,专门处理等措施。

3.3 经验总结

在加压灌注中,若发现乳胶渗出,用止血钳及时夹住导管,停止灌注,及时进行结扎处理后继续加压灌注,直至玻璃插管的橡胶端由于压力变为球状。实验中可见,模拟生理条件的大剂量含有肝素的生理盐水以恒定速度冲洗血管,并按摩大腿肌肉,效果较为满意。在推注乳胶-四氧化三铅悬浊液时一定要缓慢匀速进行。在解剖中显示,此配比浓度下的乳胶-四氧化三铅悬浊液对0.2mm以下的部分细小动脉未能完全灌注,有待改进溶液的浓度。

参 考 文 献

[1] 郝丽文,段永壮,王增涛,等.氧化铅悬浊液灌注法在血管研究中的应用[J].中国临床解剖学杂志,2007,25(6)：721-723.

[2] 漆光平,杜亚政,潘爱华,等.乳胶血管灌注的技术探讨[J].湖南医科大学学报,2000,25(4)：411-412.

[3] 楼新法,梅劲,Christopher R,等.明胶-氧化铅血管造影术的优化[J].中国临床解剖学杂志,2006,24(2)：259-262.

[4] Tang M,Yin Z,Morris S F.A pilot study on three-dimensional visualization of perforator flaps by using angiography in cadavers[J].Plast Reconstr Rurg,2008,122(2)：429-437.