湖南本土牡丹遗传多样性与亲缘关系的ISSR分析

钟丽凡， 吕长平， 许文婷， 陈海霞

(湖南农业大学园艺园林学院，湖南长沙 410128)

牡丹(PaeoniasuffruticosaAndr.)为芍药科(Paeniaceae)芍药属(PaeoniaL.)牡丹组(Sect.Moutan DC.)植物，是我国特有的植物种质资源[1-3]。我国牡丹品种多样，观赏牡丹分布地区以西北地区为主。湖南也是牡丹自然分布地区之一，其品种耐高温高湿、抗病虫害，但花色单一、花型简单缺乏观赏价值。因此，如何将观赏牡丹与湖南牡丹的优良特性结合成为当前推广湖南牡丹的首要任务。

目前牡丹育种工作主要以人工定向杂交选择为主[4-5]。但现有湖南牡丹品种大多数亲缘不清，对湖南具体牡丹品种数的统计比较笼统，存在育种工作效率低下、品种出新率低的问题。因此，研究清楚湖南本土牡丹种质资源亲缘关系与遗传多样性对后续的选育工作至关重要。

简单重复序列区间(inter-simple sequence repeat，简称ISSR)分子标记，由简单重复序列(SSR)标记技术发展而来，ISSR分子标记结合了随机扩增多态性DNA(randomly amplified polymorphic DNA，简称RAPD)的优点，同时克服了RAPD、SSR、限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism，简称RFLP)等技术的缺点[6-7]，具有高效、快速、稳定、易操作、成本低等优点，目前广泛应用于亲缘关系鉴定、种质资源遗传多样性分析等领域。本试验采用ISSR分子标记技术对湖南本土牡丹亲缘关系和遗传多样性进行研究，为选育优良牡丹品种提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

通过走访湖南当地林业和农业部门、公司、企业、个体从业爱好者，对栽培时间长、来源不清的湖南牡丹种质资源进行调查。2014—2016年于开花期(3月下旬至4月上旬)、种子成……