烟草茎点病在贵州省的发生及病原鉴定

江 艳， 桑维钧， 曾尔玲， 王 勇， 王德凤， 覃 可

(1.贵州大学农学院，贵州贵阳 50025； 2.贵州大学烟草学院，贵州贵阳 550025；3.贵州山地农业病虫害重点实验室，贵州贵阳 550025)

烟草约于17世纪初传入我国[1-2]，是我国重要的经济作物。烟草行业在世界各产烟国经济中占有非常重要的地位，我国更是世界上的烟草产销大国。在生产上，烟草病害是制约烟叶产量提高的重要因素。至2002年，已报道的烟草病害有116种，其中侵染性病害有79种，非侵染性病害37种[3-4]。2016年7月笔者于贵州大学烟草实习基地及贵州省遵义市播州区乐山镇发现疑似烟草茎点病，但目前对该病害的报道不多[5-8]。鉴于此，本研究对该病原菌进行形态学鉴定，并经柯赫氏法则对其致病性进行验证，分析其rDNA-ITS及LSU基因序列，以明确烟草茎点病的致病菌，为烟草茎点病后期的相关研究提供依据。

1 材料与方法

1.1 病害症状观察

2016年7月通过对贵州省多个主要产烟区烟草病害的调查及采样，于贵州大学烟草实习基地及贵州省遵义市播州区乐山镇K326上发现烟草茎点病，采集具有典型症状的烟株茎秆，观察并记录病害症状。

1.2 病原菌的分离、纯化及形态特征观察

将所采病茎放在体视显微镜下观察并挑取单个分生孢子器，置于无菌水中制成孢子悬浮液，涂布到水琼脂(WA)平板上。挑取单孢接种到马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上，28 ℃ 恒温培养2～3 d，然后进行纯化保存，之后转入试管中置于4 ℃条件下保存备用。如果单孢子不长菌落，则直接挑取单个分生孢子器接种到平板上进行分离。……