PI 3K/AKT信号通路阻断药联合小檗碱对前列腺癌DU145细胞生长的抑制作用

凡治国，李志平，任超

安阳市肿瘤医院普内科，河南 安阳455000

目前，前列腺癌的治疗方式主要有内分泌疗法、化疗和放疗[1-2]。研究表明，磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶（phosphatei-dylinositol 3 kinase/serine-threonine kinase，PⅠ3K/AKT）信号通路与肿瘤的发生、发展密切相关，能够参与调控肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡等多种生物学过程，在肿瘤细胞放疗和化疗的拮抗中起重要作用[3-4]。小檗碱又名黄连素，是一种季胺型异喹啉类生物碱，主要存在于小檗科、毛莫科黄连属等植物中。小檗碱具有清热解毒和消炎的作用，传统中医常用于治疗胃肠道疾病[5]，其对糖尿病和心血管疾病等也具有较好的疗效[6-7]。另外，有研究表明，小檗碱对多种肿瘤细胞的生长具有抑制作用[8]。本研究探讨了PⅠ3K抑制药——LY294002联合小檗碱对前列腺癌DU145细胞生长的影响，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 主要材料

人前列腺癌DU145细胞购自中国科学院细胞库，小檗碱、LY294002购自Sigma公司，RPMⅠ1640培养基购自Ⅰnvitrogen公司，胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）购自Gibco公司，PⅠ3K、p-AKT、cyclin D1、bcl-2和BAX单克隆抗体及辣根过氧化物标记的二抗购自美国Abcam公司，MTT试剂盒购自Promega生物技术有限公司，Annexin-V-FⅠTC/PⅠ细胞凋亡检测试剂盒购自生工生物工程有限公司，RNase A购自Solarbio公司，蛋白提取试剂盒、BCA蛋白浓度检测试剂盒购自碧云天生物技术研究所。CO2培养箱、全自动酶标仪购自Thermo Fisher公司，倒置显微镜购自日本尼康公司，流式细胞仪购自Beckman Coulter公司，蛋白化学发光凝胶成像系统FluorChem E购自美国Protein Simple公司。

1.2 实验方法

1.2.1 细胞培养 从液氮罐中取出装有前列腺癌DU145细胞的冻存管，放入37℃恒温水浴锅中快速解冻，待细胞完全溶解后，在超净台中用移液枪将细胞转移至5 ml无菌离心管中，加入含有10%FBS的RPMⅠ1640细胞培养液，离心弃上清。……