HPLC法测定舒肝解郁胶囊中芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷的含量

胡洁，苟琰，周娟

舒肝解郁胶囊为成都康弘药业集团有限公司独家品种，其原标准号为YBZ10382008，具有疏肝解郁，健脾安神等功效，用于治疗轻、中度单相抑郁症属肝郁脾虚证者，症见情绪低落、兴趣下降、迟滞、入睡困难、早醒、多梦、紧张不安、急躁易怒、食少纳呆、胸闷、疲乏无力、多汗、疼痛、舌苔白或腻，脉弦或细。处方由贯叶金丝桃和刺五加两味药组成。原标准仅有总黄酮的紫外吸收度检查，专属性差，可控性不强。贯叶金丝桃含量测定采用的方法多为HPLC，且多为二元梯度，参考了相关文献资料[1-2]，进行了二元梯度的分离，分离度和峰形不能达到要求，后改为三元梯度，在进行梯度优化后，分离度和峰形均能达到要求。

1 仪器与试药

Agilent1200高效液相色谱仪（四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、DAD检测器以及Agilent数据处理）；甲醇、乙腈（色谱纯，Fisher公司）；水为Milli-Q超纯水；其余试剂均为分析纯；对照品。

芦丁对照品（中检所：100080-200707，含量9 0.5%），金丝桃苷对照品（中检所：111521-201004，含量93.9%），异槲皮苷对照品，（中检所：111809-201202），中国药品生物制品检定所；疏肝解郁胶囊，每粒装0.36g，生产批号：101002,成都康弘药业集团有限公司。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：AQ Welch（C184.6×250 mm 5 μm）；流动相：A为甲醇，B为乙腈，C为0.1%磷酸溶液，按表1进行梯度洗脱，流速0.6 mL·min-1，柱温35 ℃，检测波长为360 nm。色谱图见图1。

表1 流动相梯度

图1 HPLC图A.缺贯叶金丝桃阴性 B.舒肝解郁胶囊样品 C.对照品1.芦丁 2.金丝桃苷 3.异槲皮苷

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品溶液 精密称取芦丁对照品20.12 mg；金丝桃苷对照品10.12 mg；异槲皮苷对照品16.40 mg分别置50 ml、25 ml、25 ml的容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取芦丁对照品溶液5 ml、金丝桃苷对照品2 ml、异槲皮苷对照品1 ml置同一25 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。……