辣椒ToMMV的分子鉴定

陈灵芝张 茹魏兵强王兰兰高彦萍张 武

〔1甘肃省农业科学院蔬菜研究所，甘肃兰州 730070；2甘肃省马铃薯脱毒种薯（种苗）病毒检测及安全评价工程技术研究中心，甘肃兰州 730070〕

辣椒病毒病是近年来甘肃省辣椒生产中普遍发生的病害，植株一旦被病毒病感染，常表现为叶片皱缩、斑驳、黄化、花叶、坏死、畸形和植株矮化，且发病率极高，传播迅速，易造成严重减产，产量损失达20%～70%。徐秉良（2001）报道侵染甘肃省辣椒的主要病毒为CMV，文朝慧等（2010）利用DAS-ELISA和RT-PCR法对甘肃省制种基地辣椒病样进行检测，结果表明TMV和CMV是优势毒原种群，检出率分别为44.4%和33.3%。

笔者多年来从事辣椒杂交育种工作，自2014～2016年在甘肃省农业科学院蔬菜研究所辣椒育苗棚、试验地分别发现辣椒幼苗和成株疑似感染病毒病，主要症状表现为幼苗从第1片真叶畸形，叶片皱缩、黄化，个别植株生长点坏死。此后，随着幼苗生长及定植，症状有所缓解，但在9、10月辣椒采收后期，叶片皱缩、黄化、畸形症状加重。对辣椒病毒病病原种类进行准确的鉴定是进行有效防控和筛选抗毒种质的前提。在参考前人对辣椒病毒病鉴定的工作基础上，本试验以采集于甘肃省农业科学院蔬菜研究所试验地的病样为材料，利用TMV/CMV双抗体夹心酶联免疫试剂盒（DAS-ELISA）和RT-PCR方法进行病原的检测和鉴定。

1 材料与方法

1.1 病毒病发病调查及样品采集

2015年3月至2016年9月，在甘肃省农业科学院蔬菜研究所辣椒育苗棚和试验田调查病毒病发生情况，并采集疑似感染病毒病的样品。……