江兴华 崔龙萍 张小兰 陈丽萍 阮鹭静 福州大北农生物技术有限公司 福州 350014
猪圆环病毒病是危害全球养猪业的重大经济影响性疾病,也是我国养猪业的三大疾病之一,与猪瘟和猪蓝耳病并称我国养猪业的三座大山[1]。猪圆环病毒2型(PCV2)可引发断乳后仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪繁殖障碍、母猪流产死亡综合征、育肥猪的慢性呼吸道病综合征和猪皮炎和肾病综合征等多种疾病,给养猪业带来很大的经济损失[2]。目前为止,疫苗免疫仍是控制PVC2感染引起相关疾病的重要手段,在疫苗的研制中,病毒抗原含量对免疫效果影响较大,由于PVC2在细胞中不产生细胞病变,体外增殖能力差,增殖滴度不高[3]。传统的生产猪圆环病毒的方法是使用转瓶细胞培养,随着细胞培养技术的发展,应用微载体生物反应器技术培养猪圆环病毒可大大提高抗原效价。
微载体系统细胞培养技术自1967年被用于动物细胞大规模培养,使动物细胞培养进入高密度培养阶段,经过几十年的发展,该技术已日渐完善和成熟,正逐渐取代转瓶的生产模式[4],为了提高微载体生物反应器培养猪圆环病毒2型的抗原效价,本试验旨在对微载体生物反应器接种细胞时使用不同的接种密度培养猪圆环病毒2型进行研究,观察不同组的贴壁情况、不同时间的细胞状态、细胞增长情况,对比最终收获的抗原效价,从而选择微载体生物反应器的细胞最佳接种密度培养猪圆环病毒,提高抗原效价,提高猪圆环病毒2型灭活疫苗的免疫效果。……