陈 鹏,李 波,彭 智,高 淦,陈 盛
(1.贵州省人民医院骨科,贵阳 550002;2.陆军军医大学西南医院儿科,重庆 400038)
骨科植入物感染的发生率虽然较低,但是感染易依附植入材料形成生物膜,使感染迁延难愈导致感染治疗的失败[1-2]。表皮葡萄球菌是骨科植入物感染的最常见病原菌[3],其黏附和生物膜形成能力是致病能力的重要因素,将直接影响到治疗结果。而ica操纵子合成的胞间多糖黏附素(polysaccharide intercellular adhesion,PIA)是其黏附和生物膜形成的关键因素。有研究表明ica操纵子对细菌的黏附和生物膜形成能力均具有重要影响[4-5],但目前尚未见有对骨科植入物及其黏附能力及生物膜形成能力的报道,据此本研究拟以临床分离株为研究对象,探讨ica操纵子基因表达对细菌在不同骨科植入物表面黏附和生物膜形成的影响。
1.1菌株来源和材料 17株表皮葡萄球菌中7株来源于贵州省人民医院的植入物感染分离株,10株来源于陆军军医大学西南医院骨科植入物感染分离株。骨组织、钛合金和不锈钢生物材料被切割成直径为10 mm,厚度为2 mm的圆盘形状。骨组织材料采用新西兰白兔的脊椎骨,用蒸馏水冲洗去除骨髓内容物,然后在室温用含0.1%乙二胺四乙酸(EDTA) 的1× 磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤,70%乙醇和紫外线灭菌处理后在DMEM培养基上进行无菌检查,孵育2周以排除培养基中的任何其他细菌生长。
1.2试剂和仪器 血琼脂平板购自重庆庞通公司,胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)培养基购自英国Oxoid公司,结晶紫购自美国Sigma公……