拉米夫定和阿德福韦酯双重耐药HBV株临床检出特点与表型特性分析

陈容娟，刘　妍，李晓东，杜凤霞，思兰兰，李　乐，许智慧，姚增涛，戴久增，徐东平，段昌柱

核苷（酸）类似物[nucleos(t)ide analogues,NAs]是最主要的抗慢性HBV感染药物。在我国，最早上市的拉米夫定（lamivudine, LAM）和阿德福韦酯（adefovir, ADV）仍被临床广泛应用。其中LAM具有较高的耐药发生率（5年耐药率为70%）[1]，且与ADV无交叉耐药位点，因此临床上积累了大量的LAM耐药换用ADV单用或联用进行挽救治疗的慢性HBV感染者[2-3]。在长期LAM或ADV单药序贯治疗下，由于药物压力产生耐药病毒，患者产生同时耐LAM和ADV的双重耐药HBV的几率增加[4]，继而发生病毒学和/或生化学突破，不仅加大临床治疗难度，同时其传播风险也给公共卫生安全带来了隐患[5]。目前，临床上对HBV感染的LAM/ADV双重耐药谱尚缺乏全面的分析。在前期对我国患者多重耐药HBV的研究基础上[6-7]，本研究通过对我国临床大样本来源的慢性HBV感染者中LAM/ADV双重耐药HBV株的检出率、病毒突变类型及突变病毒株演变和表型耐药分析，以期为深入了解我国临床流行的LAM/ADV双重耐药HBV感染特点提供参考，并为LAM/ADV双重耐药HBV感染的防治和挽救治疗提供实验依据。

1　对象和方法

1.1 对象与方法 研究对象为2007年7月—2015年12月在解放军第三〇二医院诊治的26 553例慢性HBV感染患者，均接受相关的NAs治疗。诊断标准符合《慢性乙型肝炎防治指南（2015年更新版）》[8]，HBV DNA定量（2012年4月前临床检测下限为100 IU/ml，4月后为40 IU/ml）、血清生化学和免疫学常规检查项目由解放军第三〇二医院临床检验中心完成。无其他病毒重叠或混合感染，血清冻存于-20 ℃。

1.2 主要试剂 病毒DNA-OUT提取试剂盒（北……