雷公藤红素通过调节脂质合成及氧化降低HepG2细胞甘油三酯水平的研究

冯泽民，万星勇，虞朝辉，厉有名

雷公藤红素是从雷公藤属植物根部中提取的一种五环三萜类化合物，具有多种生物学功能，其抗炎和抗氧化作用可以用来治疗自身免疫性疾病及神经退行性疾病[1]。近年来，雷公藤红素在脂质代谢中的作用受到了越来越多的关注。Ma等[2]发现雷公藤红素可以激活热休克因子1，后者通过激活过氧化物酶体激活受体γ共激活剂 -1α（peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1α, PGC1A）相关的代谢程序调控能量消耗，最终能治疗小鼠肥胖及胰岛素抵抗。Guan等[3]报道雷公藤红素可以通过激活AMPK-PGC1A通路，减轻糖尿病大鼠的骨骼肌氧化应激。雷公藤红素是否在非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD）的发生发展中起作用尚未明确。本研究旨在通过软脂酸（palmitic acid,PA）诱导的NAFLD细胞模型，研究雷公藤红素是否能降低HepG2细胞内TG含量，从而进一步探究其参与NAFLD发生发展的具体机制。

1　材料与方法

1.1 细胞培养 HepG2细胞购于美国模式培养物集存库，用含10%胎牛血清的培养基培养于37 ℃、5% CO2培养箱中。

1.2 实验试剂 DMEM培养基及胎牛血清均购于美国Gibco公司；抗体甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH ）、固醇调节因子结合蛋白（sterol-regulatory element-binding protein1c, SREBP-1c）以及脂肪酸合成酶（fatty acid synthase, FAS）购于美国CST公司；PA及雷公藤红素购于美国Sigma公司；细胞活性检测试剂盒CCK-8购自日本同仁化学研究所；TG测定试剂盒购自北京普利莱有限公司。

1.3 实验方法

1.3.1 HepG2细胞活度测定 将细胞悬液100 μl（约5000个细胞）接种至96孔板中，每个处理水平及对照均设置5个复孔，37 ℃、5% CO2培养24 h。吸尽96孔培养板中的培养基，PBS洗2遍。每孔加10 μl CCK-8试剂+90 μl DMEM培养基，空白对照加空白的CCK-8液。37 ℃、5% CO2培养箱放置1 h，450 nm波长下测定吸光度。……