高表达水通道蛋白7的脂肪细胞的脂代谢的研究

白晓苏 黎智森

[摘要] 目的 研究高表达AQP7的 3T3-L1 脂肪细胞的脂代谢变化。 方法 构建高表达的AQP7的 3T3-L1 脂肪细胞，测定AQP7mRNA和AQP7蛋白表达的变化，以及脂代谢指标甘油和脂肪酸的变化。 结果 与对照组比较AQP7mRNA和AQP7蛋白表达明显增加差异有统计学意义（P<0.01），培养基中甘油的水平也升高差异有统计学意义（P<0.05），脂肪酸的水平无变化差异有统计学意义（P>0.05）。 结论 高表达的AQP7蛋白，可显著减少脂肪细胞内甘油，减少脂肪细胞体积，减轻胰岛素抵抗。

[关键词] 脂肪细胞；水通道蛋白7；甘油

[中图分类号] R58 [文献标识码] A [文章编号] 1672-4062（2018）01（b）-0025-02

随着生活环境的改变，2 型糖尿病的（T2DM）的发生逐渐增加，T2DM是心脑血管疾病的独立危险因素。肥胖与T2DM的发生密不可分，胰岛素抵抗是二者的共同土壤，脂肪细胞的体积肥大和脂肪细胞数量的增加是引起体内脂肪蓄积及代谢异常的重要诱因[1-2]。脂肪细胞内的与甘油转运的的水通道蛋白7（AQP7）表达的下降，与肥胖、胰岛素抵抗和2型糖尿病的形成有关。该文将探讨高表达AQP7的3T3-L1 脂肪细胞的脂代谢的变化。

1 材料与方法

1.1 材料

pMD18T载体；Lipofectamine 2000及逆转录试剂盒转染试剂盒；3T3脂肪细胞。PCR仪，荧光定量仪。RNA 提取及逆转录试剂盒购自TaKaRa 公司；抗AQP7 抗体购自艾博抗贸易有限公司，甘油含量酶法测定试剂盒购自普利莱基因有限公司； 游离脂肪酸测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，其余试剂为市售分析纯。

1.2 方法

高表达APQ7的3T3脂肪细胞的建立对合成ap2的-63bp/5.4-4.9kb的启动调节区和AQP7基因的CDS區全序列进行分析，构建载体 ap2-AQP7。 构建的腺病毒表达载体ap2-AQP7经Pac I消化后Lipofectamine 2000转染293A细胞，包装病毒，收集病毒原液，并采用免疫法检测腺病毒滴度，以不含ap2-AQP7的空载腺病毒作为阴性对照。……