实时PCR检测乙肝DNA与磁微粒化学发光法检测乙肝五项的关系

姜美燕

【中图分类号】R446.61 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2018）06--01

乙型肝炎（乙肝）是一种临床常见的慢性传染病，最近的流行病学调查研究显示，我国乙肝的发病率一直居高不下，且有一定的上升趋势，因此加强对乙肝的诊治和预防意义重大，其中检测乙肝病毒是一个重要环节[1]。磁微粒化学发光法是临床上检测乙肝五项指标的常用方法，其可以直接反映人体对乙肝病毒的免疫反应状态，但无法直接反映乙肝病毒在人体内的复制情况[2]，实时PCR能检测患者血清中乙肝病毒DNA的含量，从而直接反映患者血液中乙肝病毒载量[3]。本研究旨在探讨实时PCR检测乙肝DNA与磁微粒化学发光法检测乙肝五项的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选择2015年10月至2017年10月到我院就诊的192例乙肝患者作为研究对象，其中男118例，女74例，年龄19-67 岁，平均年龄（40.4±11.2）岁，病程为 4个月-23 年，平均病程（8.9±2.3）年。

1.2 研究方法

1.2.1 样本采集 采集患者晨空腹静脉血2mL，3000rpm离心10min，分离血清，将其平均分为两份，-80℃保存待测，一份用于磁微粒化学发光法检测乙肝五项，一份用于实时PCR检测乙肝病毒DNA 含量。

1.2.2 磁微粒化学发光法 严格按照郑州安图生物工程有限公司生产的乙肝五项检测试剂盒操作步骤检测患乙肝者血清中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb水平。

1.2.3 实时PCR法 采用磁珠法提取患者血清中乙肝病毒DNA，使用罗氏Cobas z 480全自动荧光PCR分析仪扩增乙肝病毒DNA，PCR反应条件：93℃ 2min→1个循环，93℃ 45s→55℃60s→10个循环，93℃ 30s→55℃ 45 s→30个循环，40℃ 20s→1个循环，乙肝DNA检测试剂盒购自中山大学达安基因有限公司。在反应结束后，采用实时PCR专用自动分析软件统计乙肝病毒DNA含量。……