大鼠少突胶质细胞体外培养方法

孟赞 唐栎

摘 要： 目的：体外培养高纯度的少突胶质细胞。方法：取SD乳鼠脑皮质，用增殖培养基联合EDTA消化机械吹打分离纯化法培养纯化；光学显微镜观察细胞形态；纯化培养3d后免疫荧光染色鉴定细胞类型。结果：获得高纯度的少突胶质前体细胞以及成熟的少突胶质细胞，少突胶质前体细胞免疫荧光A2B5标记阳性，成熟少突胶质细胞免疫荧光MBP标记阳性。结论：用增殖培养基联合EDTA消化机械吹打分离纯化法可以得到高纯度的少突胶质前体细胞以及成熟少突胶质细胞。

关键词： 少突胶质细胞；原代培养；细胞增殖；EDTA

少突胶质细胞（oligodendrocytes， OLs）是中枢神经系统中胶质细胞的[1]。少突胶质细胞由少突胶质前体细胞 （oligodendrocyte progenitor cells， OPCs）分化成熟而来，少突胶质细胞生长发育的损伤可致脱髓鞘疾病导致神经系统损伤[2]，因此研究少突胶质细胞的损伤机制，促进少突胶质细胞修复是我们的目标。所以得一种简单高效的培养少突胶质细胞的方法具有重要的意义。本实验在传统的培养方法的基础上，对细胞增殖和分离纯化等相应步骤进行了适当改进，简化了实验操作步骤，节约了实验成本，成功获取了大量的少突胶质细胞，为研究少突胶质细胞的损伤的其分子机制奠定基础。

材料和方法

1 材料 清洁级出生0～3d SD乳鼠，雌雄不限，动物饲养环境为清洁级，实验过程对动物的处置符合相关动物伦理学要求，B104神经母细胞瘤细胞株，DMEM/F12，胎牛血清，胰酶，多聚赖氨酸（PDL），小 鼠 抗 A2B5 抗体，羊抗小鼠髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein，MBP）等。……