周龄对非肥胖型糖尿病背景小鼠体外受精效果的影响

阎 涛，胡 萍，徐 晨，王 琪，史丹丹，赵 静，王宏宇

(南京大学-南京生物医药研究院，南京 211800)

非肥胖型糖尿病(non-obese diabetic，NOD)小鼠是Makino及其同事繁育出的一种小鼠品系[1-2]，在自身免疫性Ⅰ型糖尿病研究中具有重要作用。分析目前已有的实验结果，发现NOD背景小鼠体外受精效率低，每只雌鼠平均可用的二细胞数量少，而且有资料显示NOD背景小鼠在体外受精过程中存在发育迟缓的现象[3]，因此本课题组对现有的实验操作进行改进，通过对不同周龄鼠体外受精效率的比较以及增加一次二细胞期受精率的统计，发现10周龄的NOD背景雌鼠进行体外受精效率明显高于其他周龄鼠，这一发现对NOD背景小鼠体外受精操作具有重要的指导作用。

1 材料和方法

1.1 实验动物

体外受精实验：4周龄(15～18 g)，6周龄、8周龄、10周龄(20～25 g)的NOD背景雌鼠(数量见表1、表2)；3～6月龄(30～35 g)NOD背景雄鼠，每次实验2只共4只。胚胎移植生仔率统计：受体全部采用3月龄(体重为25～35 g)的ICR雌鼠，4周龄、8周龄、10周龄实验组分别移植55只、40只、30只，共125只。实验动物(SPF级)全部由南京大学-南京生物医药研究院提供[SCXK (苏) 2015-0001]。饲养于南京大学-南京生物医药研究院屏障环境动物房(SPF级)[SYXK (苏) 2015-0001]。所有实验动物的操作程序均在南京大学-南京生物医药研究院实验动物管理和使用委员会(Institutional Animal Care and Use Committee，IACUC)批准下进行(AP号：NRCMM05)。所有实验动物操作均符合实验动物的福利伦理，并给予实验动物人道主义关怀，符合实验动物使用的3R原则。

1.2 主要试剂与仪器

PMSG(孕马血清雌激素，宁波三生公司)；hCG(人绒毛膜促性腺激素，宁波三生公司)；……