血清γ-干扰素诱导蛋白10在活动性肺结核患者中的诊断价值

张 迪， 孟存仁， 王家路

(新疆医科大学第一附属医院医学检验中心， 乌鲁木齐 830054)

结核病是一种呼吸道传染病，是由于结核分枝杆菌(mycobouterium tuberculosis，MTB)感染而引起。近年来，由于结核分枝杆菌耐药株的出现，人类免疫缺陷病毒合并结核分支杆菌感染，造成全球结核病的流行。每年结核病感染人数高达800～1 000万例，其中有300万例因为结核病而死亡[1]。因此，对于结核病的早期诊断对控制结核疫情起到至关重要的作用；病原体的检出无疑是诊断结核病的金标准，但是此方法的敏感度低。γ-干扰素(interferon-γ，IFN-γ)释放实验(interferon gamma release assay，IGRA)已被广泛应用于结核病的诊断，对结核病的诊断具有良好的特异性和敏感度。γ-干扰素诱导蛋白10(γ-interferon-inducible protein，IP-10)是一种新的趋化因子，为IFN-γ的下游趋化因子，在结核病的诊疗方面有了一系列的研究[2-3]。相关研究报道显示，IP-10在活动性肺结核患者体内高水平表达，但与IFN-γ相比较，IP-10在诊断活动性肺结核方面，是否具有较高的敏感性和特异度，文献少有报道。本研究对新疆医科大学第一附属医院住院诊治的活动性肺结核等病例进行血IP-10的检测，分析IP-10及IFN-γ对活动性肺结核的诊断效能，主要探讨IP-10及IFN-γ对活动性肺结核诊断的临床意义与效能，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料选择新疆医科大学第一附属医院2017年1-12月收治的活动性肺结核病初诊患者72例，活动性肺结核的诊断标准参照文献[4]，将72例活动性肺结核患者列为活动性肺结核组，其中男性41例，女性31例，年龄19～84岁，平均(46.5±17.2)岁；排除自身免疫性疾病、免疫缺陷性疾病和肿瘤性疾病。40例非结核肺部疾病患者(非结核呼吸病组)标本来源于本院呼吸科同期收住院的其他肺部疾病住院患者(其中包括肺炎、肺癌、肺气肿等)，其中男性28例，女性12例，年龄17～75岁，平均(52.3±19.2)岁。对照组30例，来源于同期来本院的健康体检者，男性19例，女性11例，年龄20～69岁，平均年龄(39.4 ± 12.9)岁，各项常规检查均正常，并排除其他器质性病变者。

1.2方法

1.2.1 各组血清IP-10和IFN-γ水平的检测方法 3组均在接受抗结核治疗前采集血标本，空腹采取静脉血5 mL，以3 000 r/min，4℃离心15 min，分离血清，于-20℃冰箱保存，采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清IP-10，试剂盒为联科生物科技有限公司产品，实际操作严格按试剂盒说明书要求进行。IFN-γ采用QFT-GIT试剂盒检测。

1.2.2 血T-SPOT检测方法 按T-SPOT.TB试剂盒操作规范进行，取受试者静脉血6 mL，6 h分离外周血单个核细胞，完成实验。操作严格按照实际说明书和本科室SOP文件操作。结果判定标准：阴性对照斑点数<6时，A或B抗原减去阴性对照所得；斑点数 ≥ 6时为阳性，阴性对照计数≥ 6时，检测孔斑点数≥2为阴性对照计数，判定为阳性。

1.3统计学处理采用SPSS17.0统计软件包对数据进行处理，3组之间IP-10及IFN-γ水平的比较采用方差分析,2组间数据的比较采用t检验，IP-10及IFN-γ对活动性肺结核的诊断性能使用ROC曲线比较,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.13组血清IP-10和IFN-γ水平的比较3组血清IP-10和IFN-γ水平经方差分析，差异有统计学意义(P<0.05)。两两比较，活动性肺结核组血清IP-10以及IFN-γ水平明显高于非结核呼吸疾病组和健康对照组，经比较差异有统计学意义(P<0.05)。但健康对照组和非结核呼吸疾病组两两比较，血清IP-10及IFN-γ在2组间不存在差异(P>0.05)，见表1。

表1 3组人群血清IP-10和IFN-γ水平的比较

注：与健康对照组比较，*P<0.05；与非结核呼吸疾病组比较，△P<0.05。

2.2活动性肺结核患者血清IP-10以及IFN-γ的相关性分析经相关性检验，活动性肺结核组血清IFN-γ及IP-10水平呈正相关关系(r=0.154，P=0.004)。

2.3血清IFN-γ和IP-10检测诊断活动性肺结核诊断效能比较以灵敏度为纵坐标，特异度为横坐标，绘制IFN-γ及IP-10的ROC曲线，得出IFN-γ与IP-10 2个指标诊断活动性肺结核的曲线下面积为0.927和0.975,见图1、图2。血清IFN-γ和IP-10诊断活动性肺结核的灵敏度分别为90.5%和95.9%，特异度分别92.3%和97.1%。

图1 IFN-γ的ROC曲线

图2 IP-10的ROC曲线

以健康对照组和非结核呼吸疾病组为对照，血清IP-10、T-SPOT和IFN-γ检测对活动性肺外结核的灵敏度、特异性结果比较，血清IP-10检测的敏感性和特异性(95.5%、97.1%)高于血T-SPOT的敏感性和特异性(75.4%、72.6%)，同时也高于IFN-γ的敏感性和特异性(90.5%，92.3%)，见表2。

表2 结核血清IP-10和IFN-γ检测诊断效能比较

注：Yonden指数=(灵敏度+特异度)-1； 总正确率(%)=(真阳性+真阴性)/受检人数×100%。

3 讨论

结核分枝杆菌感染机体后，T细胞和单核细胞向感染部位聚集，最终会形成肉芽肿，从而会发生一系列的炎症反应[5]。在免疫细胞的聚集过程中，趋化因子发挥着重要作用。IP-10又名CXCL10，属于CX3C亚家族趋化因子，由IFN-γ和/或脂多糖(LPS)所诱导产生的一种细胞因子[6]。IP-10在炎症部位对淋巴细胞活化和趋化的进程中起重要作用[7]。本研究通过相关检测，发现活动性肺结核组IP-10水平明显高于非结核肺部疾病组和健康对照组，提示全血结核特异性IP-10释放水平可用于活动性肺结核的诊断，并可进行推广使用。

另外，本研究通过ROC曲线比较IFN-γ和IP-10在活动性肺结核中诊断的灵敏度分别为90.5%和92.3%，特异度分别95.9%和97.1%。ROC曲线下面积可以反映诊断实验的价值，AUC在0.7～0.9时，诊断价值中等；AUC>0.9时，诊断价值较高。本研究中IP-10诊断活动性肺结核ROC曲线下面积>0.9，提示IP-10对活动性诊断有较高的诊断价值。

不同的研究结果显示，IP-10和IFN-γ对于活动性肺结核的诊断效率不一致。本研究结果显示，在对活动性肺结核诊断效率方面，IP-10和IFN-γ2种指标相比，IP-10的灵敏度与特异性略高于IFN-γ，与李晓非等[8]研究报道相似。但也有相关研究表明，IP-10与IFN-γ诊断效率上无明显差异[9]。分析原因，可能与研究对象不同有关。有研究认为IP-10在免疫缺陷病毒(HIV)等免疫抑制人群中，其效能可能会优于IFN-γ，另外，检测IFN-γ和IP-10实验室判断阳性的标准不一致，也可能造成实验结果的不同。Ruhward等[10]认为对于活动性肺结核的诊断方面，用IP-10代替IFN-γ或者与IFN-γ联合检测，可能对于结核感染的检测结核病辅助诊断和鉴别诊断更有临床意义。

范梦柏等[11]比较了IP-10和IFN-γ与良、恶性胸腔积液的相关性，研究结果证实IP-10作为结核性胸腔积液的诊断指标具有更好的灵敏性，提示其可能成为结核性胸膜炎一种新的诊断指标，本研究证实其在活动性肺结核的诊断作用，对结核性胸膜炎及肺外结核的诊断作用，还有待于扩大样本进一步研究。

王莹等[12]研究报道活动性肺结核组结核特异性IP-10水平明显高于活动性肺外结核组，可能与肺外局部结核分枝杆菌进入血循环量少，T淋巴细胞受抗原刺激较少所致。本研究未纳入肺外结核患者，后期研究纳入此类患者，进一步验证IP-10在肺外结核中的诊断价值。

总之，血清IP-10与IFN-γ的联合检测能明显提高诊断的敏感性，采用ELISA检测IP-10水平，操作方法简便，质量控制明确，今后进一步扩大样本，证实其敏感性与特异性，为活动性肺结核的快速诊断提供理论依据。同时，临床评估病情、检测抗结核药物疗效具有重要意义。