关岭自治县某牛场蜱虫病分子诊断及驱虫试验

邹 勇，图 雅，*，冯明祥，韦登雄，雷初朝

(1.关岭布依族苗族自治县动物疫病预防控制中心，贵州 关岭 561300；2.西北农林科技大学动物科技学院)

蜱是寄生于人和家畜体表的一种吸血性寄生虫，不仅能引起家畜痛痒、贫血、消瘦甚至造成动物死亡还是多种病原体的传播媒介如巴贝斯虫、泰勒焦虫等。传统的寄生虫分类鉴定常基于形态学特点，对准确鉴定不同发育阶段的虫体却具有一点的局限性。随着分子生物学技术的发展，分子鉴定已成为鉴定寄生虫虫种及研究遗传变异最直接的方法。ITS2基因片段具有复制倍数多、选择压力低、进化速度快及长度序列变异大等特点，因此该段序列作为遗传分子标记已广泛的应用于多种寄生虫的分类鉴定。寄生于牛体表的蜱虫种类较多，主要有血蜱属、璃眼蜱属、硬蜱属、牛蜱属、扇头蜱属、革蜱属。

为准确鉴定寄生于关岭牛的蜱虫种属，为临床用药提供依据，本实验以贵州关岭自治县关岭牛体表分离的蜱虫为试验对象，利用聚合酶链式反应技术(polymerase chain reaction，PCR)扩增其ITS2基因，通过分析该基因的遗传变异情况并构建系统发育树，从而对该虫进行准确鉴定。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 虫体来源 实验所用蜱虫采自于关岭自治县坡贡镇某牛场，经形态学初步鉴定为牛微小牛蜱，用清水洗净虫体表面的粘有的粪便后，置于75%的乙醇中固定，-20℃保存并做好标记。

1.1.2 试剂 2×Taq Master Mix试剂(康为世纪生物科技有限公司)；基因组DNA提取试剂盒(天根生物科技有限公司)；……