IL-17调控PI3K/AKT/FAS/FASL信号通路抑制Hep-2细胞凋亡

杨 明，宋 杨，张红健，季加标，杨见明

喉癌是头颈部最常见的恶性肿瘤之一，其发病率占头颈部肿瘤的三分之一，病理类型以鳞状细胞癌为主[1]。临床上喉癌的治疗主要以手术治疗或者手术联合放化疗为主，患者的喉功能如吞咽、发音功能受到不同程度的影响，并降低患者生活质量，研究新的治疗方案如免疫治疗对此类患者具有很大的前景[2]。白介素-17(interleukin-17，IL-17)是一种由CD4+ T Th17细胞、γδT 细胞、自然杀伤T细胞(NKT)、TCRβ+ Th17细胞分泌的促炎细胞因子[3]。IL-17在肿瘤免疫中发挥重要作用， 研究[4]表明IL-17通过促进肿瘤血管生成促进肿瘤生长和转移。研究[5]显示IL-17可以抑制Lewis 肺癌荷瘤小鼠MDSCs细胞(髓系来源的抑制细胞)的凋亡。课题组前期研究[6]结果表明IL-17可以通过调控IL-6/IL-6R/JAK1/STAT3信号通路影响喉癌细胞的侵袭和转移。然而IL-17对喉癌细胞凋亡的影响及其具体机制查阅国内外相关文献尚未见报道，该研究在前期研究基础上，重点研究IL-17对喉癌细胞凋亡的影响及体外机制。

1 材料与方法

1.1细胞培养上皮样细胞Hep-2细胞，属于人源性高分化喉癌细胞系，呈单层贴壁生长状态，购自南京凯基生物科技发展有限公司。常规细胞培养基(RPMI 1640+10%胎牛血清+100 mg /L青霉素+100 mg/L 链霉素)培养Hep-2细胞，置于37 ℃、5% CO2细胞培养箱孵育，1～2 d传代或者换液一次。

1.2试剂200-17(IL-17刺激剂，对IL-17具有生长刺激作用)购自美国PEPROTECH公司；胎牛血清购自美国Gibco公司；RPMI1640培养液购自美国HyClone公司；抗PI3K单克隆抗体、抗p-PI3K抗体购自美国Abcam公司；抗Fas抗体、抗FasL抗体、抗AKT抗体、抗p-AKT抗体购自美国CST公司；抗β-actin 抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司；……