虫草菌丝体与天然虫草化学成分比较研究

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冬虫夏草是一类菌虫复合体，是我国传统名贵中药材，与人参、鹿茸并称“中药三大宝”。它是由冬虫夏草菌浸染青藏高原山草甸中的蝙蝠蛾科昆虫的幼虫而形成的幼虫尸体与真菌子座的复合体，其药用价值早已为世人所公认，有着独特的医疗保健作用，可以益肾壮阳、补肺平喘、止血化痰，适用于肾虚腰痛、劳咳痰血、自汗畏寒等。常用于病后和化疗后体虚不复、失眠、肝纤维化、慢性支气管炎等，现代临床还用于肾功能衰竭、性功能低下、冠心病、高脂血症、高血压等的治疗。早在2008年，有学者对14批不同产地的冬虫夏草药材中的铅、镉、砷、汞、铜等重金属及有害元素进行了检测[1]，结果表示：有13批被测药材样品中砷元素的残留量均超标，且平均残留量较高，导致冬虫夏草砷含量过高的原因之一可能是由于当地的土壤中砷残留量较高，原因之二可能是在传统制作工艺中也会不可避免地带入某些有害元素(如重金属)。当人体摄入的微量元素量超过一定范围时，则可产生一系列的不良反应。在2016年国家安全总局已经下文明确提示消费者，长期食用野生虫草，有重金属中毒的风险。冬虫夏草含有多种化学成分，包括氨基酸、无机元素、核苷类、多糖类、生物碱类、环状肽类等组分，在19世纪80年代有研究表示冬虫夏草与其菌丝体的化学成分基本相似[2-6]，经过查找，发现近几十年文献中专属性研究天然虫草和菌丝体化学成分的却很少，本研究旨在对其化学成分进行比较研究，以期进一步了解天然虫草及其虫草菌丝体的化学成分，为虫草菌丝体的广泛应用提供一定的科学依据。

试药与仪器

试药：蒽酮、浓硫酸、无水乙醇、高碘酸钾、硫酸、碘化钾、硫代硫酸钠、淀粉、磷酸二氢钾均为分析纯，甲醇为色谱纯。所有对照品均来源于中国食品药品检定研究院，为含量测定用。西川虫草、西宁虫草、蝙蝠蛾被毛孢菌丝体、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体均购自市场。

仪器：UNICO UV-2000紫外分光光度计、Agilent 1100型高效液相色谱仪(包括紫外检测器)、SARTORIUS BT 25S电子天平、METTLER TOLEDO AL204电子天平、KQ5200B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。PS-6电感耦合等离子体发射光谱仪(美国贝尔德公司)。日立L8900氨基酸自动分析仪。

测定方法

采用HPLC法测定腺苷、核苷、麦角甾醇含量，利用紫外分光光度法测定虫草多糖含量，采用碘量法定量测定甘露醇的含量，利用氨基酸自动分析仪测定氨基酸含量，利用PS-6电感耦合等离子体发射光谱仪测定无机元素含量。

结 果

按照上述方法进行测定，结果见表1和表2。

从表1可以看出，蝙蝠蛾被毛孢菌丝体、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体、四川虫草、西宁虫草均含有腺苷、多糖、甘露醇、麦角甾醇，但多糖含量差异明显，虫草菌丝体在多糖含量上明显要高于天然虫草；均不含有虫草素；氨基酸含量上差异无统计学意义，氨基酸总量上虫草蝙蝠蛾被毛孢菌丝体含量最高。从表2可以看出，蝙蝠蛾被毛孢菌丝体、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体、四川虫草、西宁虫草均含有铁、锌、镉、铜、硒，均不含有汞，且蝙蝠蛾被毛孢菌丝体、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体未检测到铅和砷。

表1 虫草、人工培植虫草、虫草菌丝体各主要成分的含量比较

表2 虫草与虫草菌丝体无机元素含量比较(mg/kg)

讨 论

无论是野生的冬虫夏草还是冬虫夏草菌丝体均不含有虫草素，这与前期报道的一致，虫草素只存在于蛹虫草中。天然虫草由于土壤和环境等问题，容易使有毒重金属含量超标，而虫草菌丝体-蝙蝠蛾被毛孢菌丝体、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体等都是通过液体深层发酵得来的，通过上面的实验数据也可以看出虫草菌丝体中不含有有毒元素铅、砷，在化学成分上也与天然虫草基本一致，甚至某些成分的含量要优于天然虫草，故而虫草菌丝体代替天然虫草是可行的。