湖北省牛羊衣原体抗体流行病学调查

周文　彭伏虎　胡思顺

摘要：为了解湖北省牛羊衣原体病流行情况，采集了湖北省内多个地区近40个不同养殖规模的牛羊养殖场（18个牛场、20个羊场），共380份血清进行血清学检测。结果表明，380份血清中检出阳性血清168份，总阳性率为44.21%，湖北省各地区均存在衣原体抗体检测呈阳性的养殖场，牛的感染率相对较高，个别地区养殖场的衣原体抗体检测阳性率达100%。调查表明湖北省牛羊衣原体感染比较普遍，同时存在一定的地域性。

关键词：衣原体；流行病学；抗体；湖北省

中图分类号：S859.3 文献标识码：A

文章编号：0439-8114（2018）18-0092-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.18.023 开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Epidemiological Investigation of Chlamydia Antibody in Cattle and Sheep

in Hubei Province

ZHOU Wen1，PENG Fu-hu2，HU Si-shun1，ZHANG Hai-yan1，XIAO Hong-de2，LIU Yang-yang1，LI Zi-li1，BI Ding-ren1

（1.Key Laboratory of Preventive Veterinary Medicine of Hubei Province，Huazhong Agricultural University，Wuhan 430070，China；

2.Huhei Center for Animal Disease Control and Prevention，Wuhan 430070，China）

Abstract： In order to understand the epidemic situation of Chlamydia in Hubei Province，380 serum species from 40 farms （18 cattle and 20 sheep or goat） in various regions of Hubei province were collected tested by indirect hemagglutination test （IHA）. The results showed that the total positive rate was 44.21%（168/380）. All regions in Hubei province were found positive of Chlamydia antibody detection. The infection rate of cattle was relatively high，and the positive rate in some farms was up to 100%. This survey showed that Chlamydia infection in cattle and sheep was common in Hubei province，and there were also regionality.

Key words： Chlamydia；epidemiology；antibody；Hubei province

衣原体是一类介于细菌与病毒之间的专性细胞内寄生的单细胞原核微生物，其存在独特的生长发育周期，能引起人和动物的衣原体病，引起多种炎症，并可影响生殖系统，引起重大的公共卫生问题[1-3]。衣原体的宿主广泛，家畜中以猪牛羊较为易感，没有明显的年龄差别，但不同年龄的畜禽感染后的症状表现不一。近年来，家畜衣原体的感染在中国养殖场十分普遍，可引起母畜流产、死胎等多种疾患，给养殖业带来巨大经济损失[4]。而且国内动物衣原体感染的种类非常多。李静[5]应用FRET-qPCR方法对中国11个省的牛衣原体多样性。研究表明，国内奶牛群中检测到家禽衣原体、鹦鹉热衣原体、家畜衣原体和肺炎衣原体。目前，国内多个省份的家畜衣原体感染率与20世纪90年代相比有显著的提高[6]，说明衣原体对家畜的危害在加剧。为了解湖北省牛羊衣原体病的流行情况，本试验采用间接血凝试验对湖北省衣原体感染情况进行了调查。

1 材料与方法

1.1 血清样品

2016年湖北省秋季血清160份，收集自湖北省15县市11个牛场、5个羊场，共16个养殖规模不等的养殖场。2017年春季血样150份，来自5县15个场，包括5个牛场和10个羊场；2017年8-10月专程采样70份，包括黄岡1个牛场、2个羊场和天门市1个羊场、1个牛场。按常规方法分离血清，置-20 ℃保存。详细记录牛群基本情况，如来源、品种、规模等。

1.2 诊断液

衣原体IHA抗原、阳性血清、阴性血清、稀释液均购自中国农业科学院兰州兽医研究所。

1.3 抗体检测

衣原体微量间接血凝试验方法和判定标准均按中国农业科学院兰州兽医研究所提供的说明书方法和判定标准进行。具体方法为用微量加样器在V型反应板上每孔滴加75 μL血清稀释液用以铺板，然后取25 μL样品滴加于第1孔，再以4倍递呈稀释3孔，即1∶4、1∶16、1∶64。最后1孔弃去25 μL。同时设阴性对照、阳性对照和空白对照各2孔。加25 μL，抗原于各孔后，将反应板盖玻璃板后置微型振荡器振荡2 min，于37 ℃下作用2 h后判定结果。阳性对照孔的各稀释度完全凝集，阴性对照孔、空白对照孔不发生凝集，试验成立。被检血清1∶16稀释孔内呈“++”以上凝集者判为阳性。1∶4孔出现“+”及以下凝集者为阴性；1∶4孔出现“++”而1∶16孔出现“+”以下者判断为可疑，若有可疑孔则进行复检。

2 结果与分析

2.1 衣原体抗体IHA检测

被检的380份血清中检出阳性血清168份，总阳性率为44.21%。2016年秋季血清，衣原体抗体阳性率为28.13%（45/160），约57.78%（26/45）IHA≥64；2017年春季血清，衣原体抗体阳性率为36.67%（55/150），其中约65.45%（36/55）的血清IHA≥64；根据衣原体抗体检测结果，从阳性率高的地区的5个不同养殖场各随机采样10份，衣原体抗体阳性率为22.00%（11/50），但各场衣原体血清抗体阳性率存在很大的差异。对IHA效价高的养殖场进行第2次采样，衣原体抗体阳性率为70.00%（14/20），其中约30.00%（6/20）的血清IHA≥64。

2.2 衣原体感染分布

2016年秋季的血样中呈阳性的养殖场多处于丘陵地区，如鄂州、咸宁、孝感等，某些养殖场的阳性率高达100%。2017年春季的血样检測结果表明， 5个县市均存在不同程度的感染，养殖场之间存在很大的差异，个别养殖场检测阳性率达100%，麻城地区牛场3次检测率最高，大悟县较低；宜昌地区存在阴性场。

2.3 衣原体感染因素分析

本次调查所用的血样来自不同地区、不同养殖规模和饲养方式，既有规模养殖场，也有小规模散养群。血清学检测结果并不能反映养殖规模与衣原体血清阳性率高低相关，衣原体血清阳性率与地域存在某种联系；而在同一地域的养殖场的衣原体血清阳性率与饲养的方式，尤其是放牧散养有关。

3 讨论

衣原体是一类特殊微生物，流产嗜衣原体引起的羊地方性流产作为一种重要的人兽共患传染病，不仅给养羊业造成了相当大的经济损失，也危及人员健康。在饲养或处理被感染羊只过程中病原体可通过口腔或呼吸道进入人体而造成感染，被感染人员会出现轻微流感样症状，甚至导致衣原体性脑膜炎、结膜炎、肺炎。孕期的妇女被流产嗜衣原体感染可能会导致严重的败血症进而发生流产或产下死胎[7，8]。

很多报道衣原体感染状况与饲养管理水平、规模、地区疾病流行情况等多因素有关[9-13]。但血清学检测结果显示，衣原体阳性率在规模场和农户散养群之间没有太大的相关性，但与地域性有一定的关联。此结果提示对衣原体的防控重点应在引种。中国大部分地区如青海、甘肃、内蒙、西藏、宁夏、陕西、广西和北京等都存在衣原体病的危害[6，14，15]。因此，养殖场引种时注意衣原体检疫，同时减少同一地域不同种群之间的交叉活动区域，尤其是在放牧的时候。衣原体在动物消化道中含量很高，通过粪便或其他分泌物污染牧草或水源，导致牧场长期被衣原体污染。

湖北省牛羊衣原体感染率较高，但对该病的诊断和防治工作在许多地方迄今仍处于空白，应当对该地区的衣原体病尤其是引起的流产病例采取适当的控制措施，大力普及畜禽衣原体病诊断及防治方面的知识，使该病危害降至最低限度以确保人类和动物的健康安全。同时加强动物之间衣原体交叉感染以及流行病学调查方面的研究。

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