猪主动脉瓣膜中NADPH氧化酶2和4的表达

潘亚婷，刘慧兵，王立波，王 蕾，冷小敏，吕 诚，王学惠，赵国安，张 敏

新乡医学院第一附属医院心内科；新乡医学院心血管病诊疗中心 河南卫辉 453100

钙化性主动脉瓣膜病(calcific aortic valve disease，CAVD)是仅次于高血压和冠心病的第三大心血管疾病，严重威胁人类健康[1]。主动脉瓣膜主要由瓣膜间质细胞(valvular interstitial cell, VIC)组成，表面覆盖单层的内皮细胞(endothelial cell, EC)[2]。CAVD是一个主动的、多细胞参与并受复杂调控的成骨样分化过程。近来有证据[3]表明活性氧(reactive oxygen species, ROS)所介导的氧化还原信号在CAVD中起重要作用。NADPH氧化酶(NADPH oxidases，Nox)是一特殊的产生ROS的酶类家族，它们通过催化电子从NADPH转移到分子氧而产生超氧阴离子和 H2O2。目前已鉴定出7种亚型(Nox1～5、Duox1～2)。研究[4-5]表明，Nox在几乎所有的组织细胞中表达，其中心脏和血管主要表达Nox2和Nox4，但二者在多种心血管疾病如心肌肥大和动脉粥样硬化等中的作用呈现组织细胞特异性。有关Nox在CAVD中的作用目前尚不清楚，甚至缺乏关于Nox在正常主动脉瓣膜组织表达的基本了解。由于猪的心脏及瓣膜结构类似于人类，本研究观察了Nox2和Nox4在正常猪主动脉瓣膜不同部位(尖、中和根部)的表达水平，并进一步明确了它们在VIC和EC中的表达情况，现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1猪主动脉瓣膜组织的获取与处理健康成年家猪6只(1～2岁，雄性，体重100～150 kg，由新乡市肉联屠宰场提供)，处死后立即取出完整的主动脉瓣膜，用无菌冷PBS冲洗后仔细剪下3片主动脉瓣叶并保存于冷PBS中。每片瓣叶分别切取3段(根部、中部和尖部)，标记后立即放入液氮中保存以备后用。……