载脂蛋白A5 (ApoA5)经CIDEC负向调控人脂肪间充质干细胞(AMSC)成脂分化

孔 一 苏 欣 郑小燕

(1中南大学湘雅二医院皮肤与性病科,2心血管内科 长沙 410012)

多项研究已明确肥胖与动脉粥样硬化密切相关[1]。肥胖是脂肪细胞肥大和增生共同作用的结果,过多能量摄入可诱导脂肪组织中存在的脂肪间充质干细胞(adipose mesenchymal stem cell,AMSC)分化为成熟脂肪细胞,加重肥胖发生发展[2]。诱导细胞死亡的DFF45样效应因子C (cell death-inducing DNA fragmentation factor 45-like effector C,CIDEC)属CIDE家族成员,研究发现沉默CIDEC基因可使AMSC丧失成脂分化能力[3-4]。而相关机制研究表明:CIDEC通过作用于AMSC成脂分化早期关键调控因子CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding protein beta,C/EBPβ),促进后者表达,启动脂肪细胞特异性基因表达,最终完成AMSC向成熟脂肪细胞转变[5]。

载脂蛋白A5(apolipoprotein A5,ApoA5)是2001年新发现的一种载脂蛋白,也是三酰甘油(triglyceride,TG)代谢的重要调控因子。我们前期研究发现肥胖患者血浆ApoA5蛋白质水平降低与体重指数(body mass index,BMI)呈负相关[6],提示ApoA5可能参与肥胖的病理生理过程。ApoA5进入成熟脂肪细胞后,可显著下调CIDEC蛋白质水平,同时降低细胞内TG含量[7]。结合前期研究结果,我们提出假说:ApoA5通过下调CIDEC表达,继而影响C/EBPβ激活,从而抑制AMSC成脂分化。

材 料 和 方 法

组织来源经中南大学湘雅二医院伦理委员会批准[(2013)伦审第(研067)号]及患者知情同意后,获取进行腹部外科手术患者的皮下组织。所选患者平均年龄为(40.6±13.6)岁,男女比例∶1,平均BMI为(21.4±7.6)kg/m2,均无糖尿病及严重的系统性疾病。

材料来源DMEM/F12培养基、胎牛血清、Ⅰ型胶原酶、0.25%胰蛋白酶溶液等试剂购于美国Gibco公司;促分化试剂、ApoA5一抗、CIDEC一抗等抗体购于美国Sigma公司;人ApoA5蛋白质购于湖南远泰生物有限公司;PCR引物合成试剂盒、油红O吸光度检测试剂盒、TG定量检测试剂盒等购于上海碧云天生物技术有限公司。……