黄芪阿胶补铁口服液改善大鼠缺铁性贫血研究

林健 张卫华 林蔚 宫秀秀 钟礼云 陈冠敏

[摘要]目的 了解黄芪阿胶补铁口服液改善缺铁性贫血的效果。方法 选取74只大鼠，采用缺铁性饲料方法建立大鼠贫血模型，取造型成功动物，据血红蛋白（Hb）水平，采用随机区组法分成低、中、高3个样品剂量组和低铁对照组，分别按3.33 ml/kg BW、6.67 ml/kg BW和20.0 ml/kg BW和去离子水给予大鼠灌胃32 d。观察比较大鼠体重、血红蛋白（Hb）、红细胞压积（Hct）和红细胞游离原卟啉（FEP）。结果 大鼠体重与低铁对照组比较，差异均无统计学意义（P>0.05），黄芪阿胶补铁口服液3个剂量组的血红蛋白（Hb）（F=161.156）和红细胞压积（Hct）（F=78.771）均显著高于低铁对照组（P<0.05），红细胞游离原卟啉（FEP）值（F=170.516）均显著低于低铁对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 黄芪阿胶补铁口服液具有改善缺铁性贫血的功能。

[关键词]黄芪阿胶补铁口服液；大鼠；贫血

[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2018）9（c）-0035-03

Research on improving the iron-deficiency anemia in rats by Huangqi Ejiao Butie Oral Solution

LIN Jian1，2 ZHANG Wei-hua3，4 LIN Wei1 GONG Xiu-xiu3，4 ZHONG Li-yun1 CHEN Guan-min1，2

1. Fujian Provincial Key Laboratory of Zoonosis Research （Fujian Center for Disease Control and Prevention）， Fujian Province， Fuzhou 350001， China； 2. Teaching Base of Fujian Medical University， Fujian Province， Fuzhou 350001， China； 3. Beijing Body Revival Pharmaceutical Technology Development Co.， Ltd.， Beijing 100088 China； 4. Zhuhai Branch， Beijing Body Revival Pharmaceutical Technology Development Co.， Ltd.， Guangdong Province， Zhuhai 519040， China

[Abstract] Objective To get known the effect of Huangqi Ejiao Butie Oral Solution in improving iron-deficiency anemia. Methods Seventy-four rats were selected. The an animal model of anemia using iron-deficiency diet was established. These rat models were divided into the low-， medium-， and high-dose sample groups and low-iron group by random block based on the hemoglobin （Hb） level， 3.33 ml/kg BW， 6.67 ml/kg BW and 20.0 ml/kg BW， and deionized water for 32-day intragastric administration in turn. The rats′ weight， Hb， hematocrit （Hct） and free erythrocyte protoporphyrin （FEP） were observed. Results There was no significant difference in rat body weight in these sample groups compared with low-iron control group （P>0.05）. The Hb （F=161.156） and Hct （F=78.771） in the three dose groups using Huangqi Ejiao Butie Oral Solution were significantly higher than those in the low-iron control group （P<0.05）. The value of FEP （F=170.516） was significantly lower compared with that in the low-iron control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion Huangqi Ejiao Butie Oral Solution can improve iron-deficiency anemia.

[Key words] Huangqi Ejiao Butie Oral Solution； Rat； Anemia

缺鐵性贫血（IDA）是全世界发病率最高的营养缺乏性疾病之一[1]，IDA可引起认知发育不良和婴幼儿不可逆的听觉和视觉系统损伤[2-3]，孕妇贫血可造成胎儿发育不良和低出生体重[4-5]。

黄芪阿胶补铁口服液由乳酸亚铁、阿胶、黄芪、当归、女贞子、大枣等配方组成，乳酸亚铁为其补充铁来源的主要成分，辅以阿胶、黄芪、当归、女贞子、大枣等药食两用材料，其中黄芪、当归、女贞子、大枣采用了先进的工艺技术提取有效成分后加入乳酸亚铁和阿胶，制成便于服用的口服液。为了解黄芪阿胶补铁口服液改善大鼠IDA效果，本研究采用大鼠营养性缺铁模型，进行了改善贫血试验，现报道如下。

1材料与方法

1.1原料来源

黄芪、当归、女贞子：石家庄市柏林药材加工厂；阿胶：河南辅仁堂制药有限公司；大枣：佳县东方红枣业有限公司；乳酸亚铁：郑州瑞普生物工程有限公司。

1.2样品制备

取黄芪、当归、女贞子、大枣提取，滤过，合并滤液，减压浓缩。取阿膠粉碎、加水，加热融化。取乳酸亚铁及辅料加水溶解。将以上液体合并、过滤，加水至所需体积。样品为浓缩液，每ml样品相当于2 ml黄芪阿胶补铁口服液成品。

1.3实验动物

清洁级SD雄性大鼠74只，体重40～50 g。购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，实验动物生产许可证号：SCXK（沪）2012-0002号。

1.4饲养环境

福建省疾控中心SPF级动物实验室，实验动物使用许可证号：SYXK（闽）2012-0008号。

1.5分组方法

采用随机区组法。

1.6低铁饲料

低铁饲料购于南通特洛菲饲料科技有限公司。低铁饲料配方为玉米淀粉、蛋清蛋白、蔗糖、玉米油、纤维素、混合矿物盐（AIN-93G-MX）、混合维生素（AIN-93G-VX）、L-胱氨酸和氯化胆碱。

1.7研究指标

血红蛋白（Hb）、红细胞压积（Hct）、红细胞游离原卟啉（FEP）。

1.8测试仪器及生产厂家

电子天平（常熟双杰测试仪器厂）、雅培血球分析仪（美国雅培制药有限公司）、930N荧光分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）。

1.9试剂来源

大鼠血红蛋白和红细胞压积测定试剂（美国雅培制药有限公司）；游离原卟啉测定试剂（阿拉丁试剂有限公司）。

1.10缺铁性贫血大鼠模型的建立

健康断乳雄性大鼠74只，适应4 d后喂饲低铁饲料及去离子水（采用不锈钢笼及食罐），自第15天起，每7天选取部分大鼠采尾血测Hb，至多数动物Hb<100 g/L时，测全部大鼠的体重及Hb。

1.11实验方法

选取Hb<100 g/L的造模成功大鼠40只作为实验动物，根据贫血大鼠Hb水平和体重，将动物随机分为低铁对照组和3个样品组，每组10只，各组均继续喂饲低铁饲料。3个样品组剂量分别为3.33 ml/kg BW、6.67 ml/kg BW和20.0 ml/kg BW，分别称取样品（每ml样品相当于2 ml黄芪阿胶补铁口服液成品）加蒸馏水配成16.6、33.3和100.0 ml/100 ml浓度。各样品剂量组分别给予不同剂量的受试样品，低铁对照组给予等量去离子水，各组大鼠灌胃体积均为10 ml/kg BW。每7天称重并记录。连续给予32 d灌胃后，测定大鼠体重、Hb、Hct和FEP。

1.12统计学方法

使用SPSS 22.0软件进行分析。组间比较采用单因素方差分析，经方差齐性检验，方差齐的实验数据采用LSD法，方差不齐或非正态的数据先行变量转换再统计，前后比较采用配对资料t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1四组试验前后大鼠体重的比较

试验前后各剂量组大鼠体重与低铁对照组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；试验后各剂量组大鼠体重均增加（P<0.05）（表1）。

2.2四组试验前后Hb的比较

试验后各剂量组大鼠Hb浓度均高于低铁对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），且自身前后升高幅度均>10 g/L（表2）。

2.3四组试验前后Hct、FEP含量的比较

试验后各剂量组Hct均高于低铁对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；FEP含量均低于低铁对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）（表3）。

3讨论

硫酸亚铁等无机铁为第1代铁剂，硫酸亚铁中的铁以二价形式存在，比元素铁和三价更容易吸收，但无机铁服用后，解离速度快，存在严重的肠胃刺激，产生恶心、呕吐、腹痛、便秘等症状。乳酸亚铁为第2代铁剂。它提高了铁的吸收率和生物利用度，同时以离子作用+配位作用的方式替代传统无机铁的单一离子作用形式，服用后可在胃酸作用下，可缓慢释放铁离子，避免了局部高浓度铁离子对消化道的刺激，降低了胃肠道副作用，降低了毒性反应[6]。乳酸亚铁用于临床治疗IDA有较好的效果[7]。

资料表明，中药联合铁剂可在短时间内提高IDA患者的Hb浓度，降低IDA患者FEP的水平，效果好于单一使用铁剂，且对人体的血常规和生化指标无不良影响[8-9]。

清代药物学著作《本草思辨录》称阿胶为“补血圣药”，IDA临床症状在中医中属于血虚和脾虚范畴， 是因脾运失健而致气血生化不足产生的疾病，临床表现属气血两虚证。现代研究表明阿胶含有甘氨酸成分通过调节血清铁，可促进Hb合成[10]。此外，阿胶中微量元素含量以铁为最高，达到其他元素（锌、铜、锰）10倍以上[11]，这些铁元素也可以为Hb的构成提供物质基础。方中黄芪大补脾肺之气，以资气血生化之源。当归甘辛而温，养血和营，药理学研究表明，当归中的多糖能促进造血干细胞的增殖、分化，刺激红细胞的生成，增强造血系统的功能[12]。此外，利用大鼠研究当归多糖铁复合物与硫酸亚铁作为补铁剂的补铁效果比较时发现，多糖铁复合物在大鼠体内铁吸收率更高，吸收更快[13]。女贞子养阴益肾，作为改善IDA配伍成分，具有较好提升HB、RBC及全血铁的效果，并能提高铁的生物利用率[14]。大枣中和诸药，健脾和胃，缓补气血。现代研究表明，大枣提取物对IDA大鼠HGB、HCT、RBC、PLT等指标均有明显改善作用，大枣提取物可明显升高IDA大鼠血清铁含量、铁饱和度及肝脏铁含量，并明显降低血清未饱和铁结合力，从现代药理角度证实了大枣具有改善IDA的作用[15]。